美文网首页
免疫共沉淀实验和亲和纯化的区别是什么?分别适用于什么的蛋白质相互

免疫共沉淀实验和亲和纯化的区别是什么?分别适用于什么的蛋白质相互

作者: 一口亅 | 来源:发表于2020-12-21 14:33 被阅读0次
image.png

答:免疫共沉淀实验与亲和纯化的区别:
(1)免疫共沉淀以抗体和抗原之间的特异免疫反应为基础,验证两个蛋白质是否在细胞内天然结合;亲和纯化不用引入抗体。
(2)免疫共沉淀纯化瞬时且较弱相互作用的配体,亲和纯化用于纯化稳定蛋白质复合物的亚基。
(3)免疫共沉淀实验强度较低,假阳性率较高;亲和纯化强度较大,效率很高,而且可以在成分复杂的混合物中提取出目的蛋白。
(4)免疫共沉淀只能用于验证,不可以发现新的相互作用;亲和纯化可以发现新的相互作用。
免疫共沉淀适用于瞬时的,较弱的蛋白相互作用,亲和纯化难以检测瞬时的蛋白相互作用,更适合于稳定的蛋白复合物中蛋白的相互作用。免疫共沉淀的原理是形成“目的蛋白-兴趣蛋白-兴趣蛋白抗体-SPA/Pansobin”的复合物,由于SPA/Pansobin较大,在离心时会沉淀下来,因此在分离时不需要较大的外力,对相互作用的破坏较小,因此可以检测弱的相互作用;亲和纯化是通过共价键将与底物专一性可逆结合的配基偶联到基质,配基与混合物中的底物结合后,改变化学条件将其他混合物洗掉,这一过程中如果配基与底物结合的不牢固,就会被同时洗掉,因此只能用于强的相互作用。

相关文章

  • 免疫共沉淀实验的具体注意事项

    免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互...

  • 生物实验原理整理

    1.IP与co-IP:(用于研究蛋白质相互作用。。)免疫沉淀和免疫共沉淀都是基于抗原抗体结合的特性来实现的。IP:...

  • 免疫共沉淀

    免疫共沉淀原理及步骤 免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)原理 IP是利用抗原蛋白质和抗体的...

  • Abbkine免疫(共)沉淀试剂盒实验原理科普

    Abbkine免疫(共)沉淀实验原理 免疫沉淀是基于传统亲和纯化方法开发的,在含有目的抗原的细胞裂解液中加入特定的...

  • 抗体纯化填料/预装柱/试剂盒怎么选

    对于分析蛋白质个体和蛋白质复合物,鉴定蛋白质与蛋白质、核酸之间的相互作用,蛋白质的纯化是这些研究的基石。由于纯化天...

  • 蛋白质的纯化研究

    对于分析蛋白质个体和蛋白质复合物,鉴定蛋白质与蛋白质、核酸之间的相互作用,蛋白质的纯化是这些研究的基石。由于纯化天...

  • ChIP-seq分析全记录

    一、背景知识 CHIP-seq染色体免疫共沉淀技术。是研究==细胞内DNA与蛋白质互作==就是将chip实验得到的...

  • CHIP染色质免疫沉淀技术

    1、 实验简介 染色质免疫沉淀技术(ChIP)通过与染色质片段共沉淀技术,在体内检测与特异蛋白质结合的DNA片段。...

  • 易基因|一文看懂:ChIP实验和qPCR定量分析怎么做

    染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP),是研究体内蛋白质与DNA...

  • chip染色质免疫沉淀技术

    实验简介 染色质免疫沉淀技术(ChIP)通过与染色质片段共沉淀技术,在体内检测与特异蛋白质结合的DNA片段。ChI...

网友评论

      本文标题:免疫共沉淀实验和亲和纯化的区别是什么?分别适用于什么的蛋白质相互

      本文链接:https://www.haomeiwen.com/subject/xjzlnktx.html