无创产前DNA检测（testing），又称：无创母血胎儿染色体非整倍体检测，（21唐、18爱德华、13帕陶）。
2013年由ACMG首次发表声明更改NIPT为NIPS（Screening）。
胎盘滋养层细胞的游离DNA片段（cell-free DNA，cfDNA），以75~205bp 的小片段，不断的透过“胎盘-母体屏障”，并不断被降解和清除，从而以快速动态平衡的形式存在于孕妇外周血血浆中。
cfDNA的清除半衰期为16分钟，含量是母血中游离胎儿细胞可提取DNA的25倍以上。
研究表明：
孕4周，孕妇外周血可以检出cfDNA；
孕7周，建立胎盘循环后，cfDNA可以一定的比例稳定存在于母血中，至10周达到一个高峰；
孕10-21周，cfDNA处于相对平衡的水平。适宜检测时间：12~22+6周。
孕21周后，cfDNA将再次持续升高直至晚孕期；
分娩后2h，胎盘cfDNA将全部清除而无法测到。
母体血浆中胎儿游离DNA含量约占血浆中全部游离DNA的5-20%，比例随着孕周的增大而缓慢上升。
如果胎儿为21三体，则母血浆中来源于胎儿21号染色体的游离片段会有50%（3-2 /2）的上升，并引起外周血中全部21号染色体来源的片段数量微量增加（3/46—2/46）。如一个胎盘游离DNA含量在10%的唐氏综合妊娠孕妇，其外周血浆中来源于21号染色体的DNA片段含量将比正常妊娠增加1.05倍，此方法通过平行测序技术的深度测序来检测这些DNA的来源，并显示出含量的微小改变，进而实现产前检测。对21三体（100）、18三体（97.2 or 100）、13三体（78.6 or 91.7 or 100）综合检出率均为100%，假阳性率分别为：千分之3、2.8、9.7，总体标本检测失败率5%。
尽量提高敏感度，检出的假阳性可通过产前诊断排除
当然也可以标记几条染色体上的保守序列，进而大幅度降低测序深度，提高测序效率降低成本，对21三体及18三体有较好的敏感性和特异性，由于不同染色体GC含量的差别，其他染色体的非整倍体异常的检测效率有很大不同。
特别要注意的是NIPT再准确目前也只是一种筛查手段，并不能作为确诊手段。因为其仍有极低概率的假阴性，即早唐和NIPT结果均提示18三体低风险，但脐静脉穿刺显示胎儿核型为47，XN，+18。
1.专用的采血管：美国公司Streck自主研发生产的Streck Cell-Free DNA BCT采血管和美国Ardent BioMed公司研制设计Ardent Cell-Free DNA BCT采血管。目前是否需要专用管并不清楚。
2.在指定温度范围保存、运输。
3.合格样本则分离出血浆、白细胞（部分实验室需要保持）保存。短期可-20度保存，长期则需要-80度保存。保存期为3年到5年不等。
4.提取血浆中游离的DNA片段进行纯化，磁珠充分吸附游离DNA片段，将收集到的DNA片段进行PCR扩增、添加生物识别标签和文库纯化，最后检验文库样本是否合格和浓度大小。
5.合格的文库样本，按一定的比例混合在一起，制备成混合Pooling文库。
补充知识：
颈项透明层（nuchal translucency, NT），大于3mm为增厚。其是胎儿非整倍体的独立标志物，结构异常风险增加，患先心病风险增加，是进一步行介入性产前诊断和遗传学分析的指征。
FISH能够诊断常见的21、18、13、X、Y染色体非整倍体异常，但不能诊断其他染色体数目异常及染色体结构异常。21三体能活40岁，18/13三体大概率会流产，出生后能活1-2岁，性染色体异常如正常，但可能无法生育后代。
胚胎发育过程中会发生染色体嵌合现象，有两种染色体嵌合现象：真性（胎儿和胎盘）染色体嵌合、局限性胎盘嵌合（confined placental mosaicism ,CPM），CPM是导致绒毛活检结果不确定从而出现假阳性诊断的主要原因。
网友评论