透射电镜(TEM),全称透射电子显微镜,用电磁场作透镜,把经加速和聚集的电子束投射到超薄切片的样品上(通常70-90nm),电子与样品中的原子碰撞而改变方向,从而产生立体角散射。散射角的大小与样品的密度、厚度相关,因此可以形成明暗不同的影像,影像将在放大、聚焦后在成像器件上显示出来。是一种高分辨率(0.1nm-0.2nm)、高放大倍数(0.2K-600K)的显微镜。是观察和研究物质超微结构的强有力工具。透射电镜在细胞生物学、组织学、病毒学、病理学、分子生物学、材料科学等诸多领域具有广泛应用。可以观测动物植物细胞超微结构,如线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体、叶绿体、液泡、细胞内生细菌等结构及病理变化。可以观测病毒颗粒、外泌体、病原微生物、各类细菌真菌、纳米材料及纳米颗粒、晶体结构。
实验流程:包埋、制片、拍照;
取样:
1、动物组织标本
1-3min内取样,取材前可提前准备装有电镜固定液的培养皿,将小组织块离体取下后立即投入培养皿内,用手术刀在培养皿的固定液中进行切割成小块,取样组织体积控制在以下尺寸(1mm×1mm×1mm正方体、1mm×1mm×3mm长方体状、1mm×2mm×3mm薄片状)。固定液渗透能力有限,超出此范围后组织会无法完全固定,后续实验无法完成,务必请重视此过程。
② 取材时尽量精确到需要观察的目的部位(如观察肾小球取肾皮质;观察胰岛取胰岛丰富的胰尾;皮肤,肠胃等在固定液中易打卷的组织可将组织粘在滤纸上进行固定)。
③ 取材时一定注意避免镊子挤压等机械损伤,刀片要锋利避免挫伤组织。
④ 组织取下后立即投入电镜固定液内室温避光固定2h,再转移至4°保存,4°冰袋运输,在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。4°时样本可保存1个月左右。
结果展示:
参考:
https://www.servicebio.cn/goodsdetail?id=1540
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