NC文章又看了一篇非常有趣的植物R蛋白相关文章。植物免疫中的明星基因XA21,在其识别的effector介导下,C端的kinase会被切割下来进入细胞核,和WRKY62互作,调节水稻的抗病性。有意思的是,XA21的核定位是其介导植物免疫所必需的的,如果在XA21上连接一个NES,使蛋白从核中输出,XA21就无法增强植物的抗病性了。
背景介绍
XA21可增强水稻对黄单胞杆菌(Xoo)的抗性
XA21可识别并结合Xoo中保守的多肽AxY S22介导植物免疫反应
在前期研究中发现,在Myc-XA21转基因植物中,XA21结合AxYS22后会积累,并被切割释放一段110kD的N端蛋白
1.XA21被切割释放C段的激酶结构域
在XA21-CFP转基因植物中发现,用AxYS22处理后,有一段70kD的C端kinase domain会被切割下来
通过IP-western进一步确认,确实有一段C端被切割
2.XA21胞内kinase进入细胞核
在水稻原生质体中,没有AxYS22时,XA21-GFP定位在细胞膜,细胞质以及细胞核附近的ER上
在水稻原生质体中,当用AxYS22或Xoo提取物处理后,XA21-GFP在细胞核有明显的定位
在稳定转化株系中,荧光也显示相同的结果
在稳定转化株系中,western检测发现AxYS22处理后,70kD的C端蛋白在核中富集
XA21没有转录活性相关domain,是否和其他转录因子互作调节基因转录?
WRKY62负调控XA21介导的植物免疫
BiFC显示,XA21胞内C端和WRKY62在细胞核中互作
3.XA21 kinase入核是介导植物免疫必需的
既然XA21的kinase被切割入核,它和XA21介导的植物免疫有什么关系吗?
和XA21-GFP株系比,XA21-GFP-NES转化株系的抗病性降低
4.XA21的胞内domain有一个有功能的NLS
预测XA21具有一个NLS
将NLS突变后,会抑制XA21的入核
R蛋白切割入核.png
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