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科研小技巧 | 如何绘制突变mutation/插入Inserti

科研小技巧 | 如何绘制突变mutation/插入Inserti

作者: 不想透明的小透明 | 来源:发表于2020-01-03 20:35 被阅读0次

今天给大家分享一个实用技巧,RT,绘制标注外显子、内含子位置及大小、距离的基因结构图,从而更好地展示你的测序数据的结果,帮助完成下游实验的可视化。

1. 利用Ensembl辅助绘图

作为NCBI同等级对手EBI,其维护的Ensembl提供了比NCBI更便捷的外显子定位功能,而且查看界面非常友好,同时与NCBI转录本有非常完善的对应。

下面我以DPP10这个基因作为举例,

首先打开Ensembl的官网:http://asia.ensembl.org/index.html
20201230日更新,最近发现上面给的ensembl的网址进不去,刷新了好久,发现了几个其他可用的Mirrors, ensembl mirrors

Ensembl genome browser 102

点进去的页面是酱紫的~

Ensembl主页
然后在"Search"那边选择"Human", 键入要检索的基因"DPP10",出来的页面时以下: DPP10 这时候如果特别需求一般都选择第一个结果就可以了 DPP10检索结果
这个图可以往下拉,下面时一个类似UCSC Genome Browser的信息图,左边的目标栏也有很多信息,大家如果有兴趣的话可以自己探索一下~
然后点击一下“Show transcript table”,就出现了
DPP10第一个检索结果 接下来就是选择转录本进行具体exon和intron分布的查看,一般都是以最长转录本原则进行查看,这边演示选择800aa的那个转录本,直接点击Transcript ID就可以,这个时候页面会变成下面这个样子:

然后点击About this transcript带有下划线26exons,页面会变成这样:

Exon与Intron分布信息
Ensembl已经帮用户把外显子序号标好了,并且给出了每个外显子以及内含子的序列区间,非常详细,你所需要做的事就是找到自己想要研究的外显子/内含子对应的坐标及序列。

但是这些还不够,虽然已经能清楚指示你的mutation或者insertion是发生在具体某个基因的某个exon/intron,但是,在绘制基因结构图时,你还要丈量每个exon之间的距离,及每个exon的大小,这个结果还不够清晰明了,因此接下来你需要第二步。

2. 利用NCBI Splign明确Exon/Intron的位置关系和具体序列

NCBI的Splign工具通过https://www.ncbi.nlm.nih.gov/sutils/splign/splign.cgi
这个网址就可以进入,

NCBI Splign 这时候选择横条选择框当中的Online进行在线运行, Splign主页
同时打开NCBI GeneBank数据库,搜索DPP10这个基因, DPP10 NCBI
这时候直接选择右边Table of contents中的NCBI Reference Sequences (RefSeq),按照一下方式选择cDNA和Genomic的Accession号,注意!不要要小数点和小数点后的数字。
对不起我太懒了你们将就看吧
然后出来的运行结果是酱紫的~ Splign结果 如果你偷懒的话,这个出来的结果图可以直接截到你的PPT当中用啦。Segments下的数字表示的就是第几个exon的意思,点击数据相应的上面两个mRNA和Genomic的图的圈出来的区域也会换~

因此结合这两个小工具就可以清晰地绘制你的mutation/Insertion发生地基因结构图啦~ 这个笔记也是整理一下以防自己以后不记得备用,回去做PPT准备汇报啦~~ 科科

References:

[1] https://liucheng.name/347/
[2] https://cloud.tencent.com/developer/news/277555

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