基本概念
医学图像的定量分析主要包含三部分:形态几何特征参数,区域几何特征参数以及光密度参数。
在形态学实验结果中,表达反应强度或者物质含量的测量参数有光密度(Opticaldensity,OD)、吸光度(absorbency,A)和灰度(Grey level, GL)等,光密度又可以引申出平均光密度(average optical density, AOD)和积分光密度(integral optical density, IOD)。
研究表明,当光线通过某一密度均匀的物质时,被吸收光线的多少与该化学物质的含量成正比,而与照射光的强度无关。
平均透光率(T)
平均透光率.gif其中分子为被测对像的平均灰度值(透射光强度),分母为空白区域的平均灰度值(入射光强度)。
光密度(OD)
定义:光线通过介质前的入射光强度与透射光强度比值的对数值,如下: 光密度.gif平均光密度(AOD)
定义:整个视野中每一点的光密度的叠加除以点数的总和,定义如下: 平均光密度定义.gifN代表点数的总合。
积分光密度(IOD)
定义:测量标本结构范围内各个像素点光密度之和,
积分光密度.gif
其中A代表被测面积,IOD也可以解释为所测结构范围内各像素光密度值之和,IOD可以反映所测结构的光密度与面积的综合变化,IOD与物质的质量成正比,数值反映物质的相对含量。
一些讨论
光密度与物质含量的关系
在同一照明度下,不同组织透过光线的数值,是由灰度值换算而来的,测量目标颜色越深,透过的光线越少,光密度数值越大。因此光密度可以用来衡量组织或细胞中某种成分的含量。以免疫组织化学反应结果为例,对于反映产物的定量化处理,实际是图像数据经过数学能量计算之后对抗体染色数量的定量。
光密度数值的有效范围
理论上,光密度的数值范围为0<OD<∞, 但是研究中光密度数值的有效区间是0.2~1.64.
AOD和IOD的比较
光密度数值是样品所要测定的基本参数,可以反映样品中阳性物质的含量,但是相对含量,反应的是某像素点上的OD值(在未作特殊说明的时候OD即代表AOD)是整个视野中每个点的OD的的叠加除以点数总和。在标定上随机测定若干点的OD值再求平均值得办法不准确,解决的办法是将测定标本的阳性产物的OD值累加得到IOD,反映阳性物质总的相对含量。
网友评论