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实验复盘㈡------连接&转化

实验复盘㈡------连接&转化

作者: Han_zh | 来源:发表于2020-06-09 22:12 被阅读0次
    利用ClonExpress®II One Step Cloning Kit 非连接酶依赖型单片段快速克隆试剂盒

    ClonExpress®技术是一种高效的 DNA 无缝克隆技术,可将插入片段定向克隆至任意载体的任意位点。

    Prepare:
    提前打开制冰机
    连接PCR反应程序是37℃,30min(切记盖温是37℃
    LB液体和LB固体培养基
    Kan抗生素(100ml LB培养基+100μLKan)
    大肠杆菌感受态细胞(克隆感受态细胞)--Trans1-T1 Phage Resistant Chemically Competent Cell
    37℃、200rpm摇床

    1. DNA重组反应(ClonExpress II One Step Cloning Kit)
    • 于冰上配制反应体系


      连接体系.png
    • 使用移液器轻轻吸打混匀,短暂离心将反应液收集至管底

    • PCR37℃反应30min

    2. 重组产物转化
    诺唯赞连接试剂.png 转化步骤.png
    无缝克隆.png
    微信截图_20200908222038.png Step2.png

    ClonExpress®II One Step Cloning Kit

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