单细胞测序研究可以说是空前火热,甚至有人说如今单细胞测序几乎已经成了每个科研课题组的必备品。相信能下这种结论的大佬,实验室肯定是比较富余的。对于囊中羞涩的科研人员,难道就不能研究单细胞了吗?答案是否定的。因为公共数据的挖掘是没有止境的。而且已有研究人员开发了多个单细胞数据库,不管是查数据,还是简单分析,都非常方便。不过拿到了单细胞测序数据,下游分析该怎么做?今天就给大家介绍一篇相对简单的分析思路。
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文章2020年十二月份在线发表在Molecular Therapy-Oncolytics(IF: 4.115)。
Single-cell RNA-sequencing analyses identify heterogeneity of CD8+ T cell subpopulations and novel therapy targets in melanoma
单细胞RNA序列分析鉴定CD8+T细胞异质性黑色素瘤的亚群和新的治疗靶点
一、摘要:
CD8+T细胞是建立抗肿瘤免疫的关键,其高浸润性与良好的预后相关。然而,肿瘤微环境中的CD8+T细胞亚群在肿瘤的预后、进展和免疫治疗中可能起着不同的作用。作者分析了之前发表的单细胞RNA-Seq黑色素瘤数据,探索CD8+T细胞的异质性,识别了7个主要的亚群,对不同亚群进行了细致刻画。最后识别了PMEL, TYRP1, EDNRB可能作为潜在的黑色素瘤治疗靶点。
二、材料方法:
GEO scRNA-seq,TCGA SKCM,GTEx,pathway活性,CIBERSORT,K-M,GO,KEGG,GSEA,细胞网络,治疗靶点。
三、结果:
1.黑色素瘤中识别CD8+T细胞亚群
图1.黑色素瘤TME中的CD8+ T细胞亚群
2.CD8+T细胞亚群与预后相关
图2.SKCM RNA序列样本中CD8+T细胞亚群的细胞组成
3.异质性的通路活性landscape
图3.CD8+T细胞亚群代谢通路活性
图4.CD8+T细胞亚群Hallmark和免疫检查点通路活性
4.时间轨迹揭示了免疫检查点的动态变化
图5.细胞亚群分化轨迹
5.CD8+T细胞亚群中的异质相互作用对和转录因子
图6.不同亚群细胞-细胞互作与转录因子
6.新治疗靶点识别
图7.筛选并验证了新的治疗靶点
总结:
文章结合scRNA-seq和TCGA以及GTEx数据,以CD8+T细胞为切入点,探索了黑色素瘤的异质性。对于特异的细胞亚群进行了相对细致的刻画,并且最后还识别了潜在的治疗靶点。整体上来说,内容相对丰富,前后衔接也非常紧密。非常适合作为单细胞数据分析的入门参考文章。
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