抗原检测
首先将能够结合同一抗原的一对抗体分别固定于免疫层析检测试纸条的检测线(T线)与结合垫上,结合垫上的抗体带有显色标记(荧光标记或胶体金标记)。在试纸条滴样处滴加样品,样品会向试纸条另一端流动,当流动至结合垫,样品中的抗原会与结合垫上的标记抗体结合,形成“标记抗体-抗原”复合物;当样品流动至检测线时,抗原会被T线上的抗体捕获,形成“标记抗体-抗原-捕获抗体”复合物,随着T线上捕获抗原的不断增加,T线会出现愈加明显的颜色变化。C线处固定了二抗,无论样品中是否含有待测抗原都会显色。所以如果T线出现颜色变化,则说明待测样本中含有待测抗原。
抗体检测
抗体检测主要是检测患者血清或血浆样本中的IgM和IgG抗体。根据目前对新型冠状病毒入侵产生的这两类抗体时间变化的研究,通常呈现下图的变化规律。IgM是机体初次免疫应答最早产生的抗体,但持续时间不长,是近期感染的标志物,检测窗口期短,有利于早期诊断和排除可疑病例。IgG是机体再次免疫应答产生的主要抗体,在病毒持续感染一段时间后才会出现,且出现持续时间长,IgG检测可以提高诊断的准确性,减少漏诊。
抗体的检测与前面说到的抗原检测技术是类似的,也是基于免疫层析平台。将带有胶体金标记的能与抗体特异结合的抗原固定在结合垫上,在NC膜上的T线处固定抗人IgM或IgG抗体。将待测样品滴至加样处,样品向试纸另一端移动,当样品中含有待测抗体时,待测抗体与结合垫上的金标抗原结合,形成抗原抗体复合物,随后被T线上的抗人IgM或IgG抗体捕获,并显色。C线则是可以特异识别重组抗原上His/Fc等标签的抗体。若待测样品中不含待测抗体,则只有C线显色。
Spike 蛋白是冠状病毒最重要的表面膜蛋白,含有两个亚基S1和S2。其中S1主要包含有受体结合区(RBD),负责识别细胞的受体。S2含有膜融合过程所需的基本元件。Spike 蛋白承担病毒与宿主细胞膜受体结合及膜融合功能,是宿主中和抗体的重要作用位点以及疫苗设计的关键靶点。
S蛋白是COVID-19重要的致病靶点蛋白,包含两个亚基S1和S2。其中,S1主要包含有受体结合区(RBD),Coronavirus正好通过RBD与细胞表面受体结合来感染细胞。南京铭研生物助力科研,提供相关病毒试剂。
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