一、什么是反转录?
IMAGE.jpg反转录:
是指以RNA为模板合成DNA的过程。反转录是天然就存在的。
反转录的意义:
保证所有RNA病毒能够将遗传物质稳定地遗传给下一代。
二、反转录的过程:
IMAGE.jpg以mRNA为模板,首先在逆转录酶的作用下,合成与mRNA互补的DNA链(这种DNA有一个专门的称呼,叫互补DNA,简称cDNA),cDNA第一条链合成之后,mRNA被降解,DNA聚合酶又会以cDNA第一条链为模板,合成cDNA第二条链,这样就得到了双链cDNA分子。
三、cDNA与基因组DNA的区别:
- 因为cDNA来自于mRNA的复印,所以碱基序列信息跟mRNA完全相同;也就是缺少了内含子,5'端加了帽子,3'端加了尾巴;
- cDNA其实是真核生物基因的截短形式,是真核基因的核心表达序列。
四、扩增繁殖:
** 目的基因与载体连接的重组子都要先被导入细菌细胞进行克隆。**
五、克隆的目的:
1.检测目的基因与载体是否已经连接上以及是否连接正确;
2.得到较多的目的基因拷贝以备后面使用;
3.检测目的基因能否在原核细胞中表达。
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