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转录组分析中的技术重复或生物学重复检查

转录组分析中的技术重复或生物学重复检查

作者: 多啦A梦的时光机_648d | 来源:发表于2019-04-12 11:29 被阅读159次

    一: 首先准备两个文件:

    1. 基因表达的counts.matrix 文件(即上一步生成的isoforms.counts.matrix 与genes.counts.matrix )

    2. 生物学重复的表文件

    记住samples.txt中的名字需要和matrix中的名字一致,否则没办法识别。

    二: 调用PtR脚本

    $PtR  #调用PtR脚本

    --matrix isoforms.counts.matrix  #指定给定的matrix

     --samples samples.txt  #样品重复信息

     --log2  #做一个对数处理

     --min_rowSums 10  #过滤数据指标

     --compare_replicates  #输出的图像参数

    同理做genes.counts.matrix,最终会生成许多pdf文件。

    最后结果就是关于一个处理中生物学重复之间的相关性的几个图,放在一个PDF上的.

    几个图的意思还没大懂,请指教!

    三:下面进行跨样本间的相关性检测与作图

    $PtR

    --matrix isoforms.counts.matrix \

    --min_rowSums 10 \ 

    --samples samples.txt \ 

    --log2 \ #数据转换参数 

    --CPM \ #数据转换参数 

    --sample_cor_matrix #输出样品相关性矩阵图

    这个代码做出来的结果是不同样本间的数据一致性热图

    四:最后一个结果是通过PCA分析对样品重复关系进行检测。

    $PtR

    --matrix isoform.counts.matrix \

    --samples samples.txt \

    --log2 \

    --min_rowSums 10 \

    --CPM \

    --center_rows \

    --prin_comp 3

    输出结果为PCA分析图 (pdf)

    同理做genes.counts.matrix。

    到此结束!

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