今天,我们来介绍一个生信小白也可操作的软件——Loupe Browser,这款软件是10x genomics 公司为单细胞转录组数据分析提供的专门的分析结果查看软件。运行该软件需有 cellranger 输出的 *.cloupe 文件。
接下来,我们详细介绍一下该软件~
01 软件下载与安装
首先打开10x genomics官网,进行注册后即可进行该软件的下载,软件适用 Windows 和 Mac 操作系统;大家可选择适合自己的版本进行下载哦。
02 页面介绍
在收到的单细胞测序结果文件夹中找到后缀名为*.cloupe的文件,通过左上角的Open File,导入后缀名 cloupe 的文件,或直接双击*.cloupe文件进行打开,打开成功后的页面如下:
主页面是t-SNE 降维后的结果,图中每个点代表一个细胞条形码,每种颜色代表每个cluster。
a. 分页视图:主页面视图拆分选项;
b. 细胞选择工具:可手动增减细胞或定义细胞所属类;
c. 投影模式选择:cloupe 文件自带 tSNE/UMAP 视图,也可导入带坐标信息是csv文件:第一列为 barcode,第二列为:坐标 1,第三列为:坐标 2);
d.功能模块:选项框决定视图属性(Categories:展示Cluster 属性;Gene/Feature Expression:展示基因 count 属性;Filter:设置 barcode过滤属性;V(D)J Clonotypes:输入与之对应的 vloupe 文件,查看 B/T 细胞的克隆型);
e. 差异基因展示:可导出excel ,展示热图/小提琴图;
f. 工具栏:可选择barcode 点大小,导出图片。
03 功能介绍
在Gene/Feature Expression → 输入基因 →未选中基因,通过此操作可查看list中基因在 barcode 中的表达情况,其中图中红色部分即表达 CD79A 或 CD3E 的细胞。
在Gene/Feature Expression → 输入基因 → 选中基因,通过此操作可查看选中基因在 barcode 中的表达情况,其中图中红色部分即表达 CD79A 的细胞。
选中 CD79A 基因,在右下角select by count-active feature list 中选择大于0(即该基因表达量大于零)>Assign selection,即可对表达 CD79A 的细胞进行重新命名。
这里可看到表达表达 CD79A 的细胞为716个。
本次对 Loupe Browser 的简单使用说明就分享结束,后续我们会继续分享复杂一点的使用教程。比如过滤功能等,大家可持续关注我们哦~
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