bam / sam格式说明

作者: 生信师姐 | 来源:发表于2020-11-09 10:35 被阅读0次

    在SAM输出的结果中每一行都包括十二项通过Tab分隔(\t),从左到右分别是:

    1 QNAME,序列的名字(Read的名字)
    2 FLAG, 概括出一个合适的标记,各个数字分别代表

    • 1 序列是一对序列中的一个
    • 2 比对结果是一个pair-end比对的末端
    • 4 没有找到位点
    • 8 这个序列是pair中的一个但是没有找到位点
    • 16 在这个比对上的位点,序列与参考序列反向互补
    • 32 这个序列在pair-end中的的mate序列与参考序列反响互补
    • 64 序列是 mate 1
    • 128 序列是 mate 2

    假如说标记为以上列举出的数目,就可以直接推断出匹配的情况。假如说标记不是以上列举出的数字,比如说83=(64+16+2+1),就是这几种情况值和。

    3 RNAME,参考序列的名字(染色体,contig)

    4 POS,在参考序列上的位置(染色体/contig上的位置)

    5 MAPQ, mapping qulity 越高则位点越独特

    比对有时并不能完全确定一个短的序列来自参考序列的哪个位置,特别是对那些比较简单的序列。但是会给出一个值来显示这段序列来自某个位点的概率值,这个值就是mapping qulity。Mapping qulity的计算方法是:Q=-10log10p,Q是一个非负值,p是这个序列不来自这个位点的估计值。

    假如说一条序列在某个参考序列上找到了两个位点,但是其中一个位点的Q明显大于另一个位点的Q值,这条序列来源于前一个位点的可能性就比较大。Q值的差距越大,这独特性越高。

    6 CIGAR,代表比对结果的CIGAR字符串,如37M1D2M1I,这段字符的意思是37个匹配,1个参考序列上的删除,2个匹配,1个参考序列上的插入。M代表的是alignment match(可以是错配)

    #standard cigar:
    M match
    I insertion
    D deletion
    
    #extended cigar
    N gap
    S substitution
    H hard clipping
    P padding
    = sequence match
    X sequence mismatch
    

    7 RNEXT, mate 序列所在参考序列的名称; 下一个片段比对上的参考序列的编号,没有另外的片段,这里是’*‘,同一个片段,用’=‘;

    8 PNEXT, mate 序列在参考序列上的位置;下一个片段比对上的位置,如果不可用,此处为0;

    9 TLEN,估计出的片段的长度,当mate 序列位于本序列上游时该值为负值。Template的长度,最左边得为正,最右边的为负,中间的不用定义正负,不分区段(single-segment)的比对上,或者不可用时,此处为0;

    10 SEQ,read的序列;序列片段的序列信息,如果不存储此类信息,此处为’*‘,注意CIGAR中M/I/S/=/X对应数字的和要等于序列长度;

    11 QUAL,ASCII码格式的序列质量;序列的质量信息,格式同FASTQ一样。

    12 可选的字段(field)

    AS:i 匹配的得分
    XS:i 第二好的匹配的得分
    YS:i mate 序列匹配的得分
    XN:i 在参考序列上模糊碱基的个数
    XM:i 错配的个数
    XO:i gap open的个数
    XG:i gap 延伸的个数
    NM:i 经过编辑的序列
    YF:i 说明为什么这个序列被过滤的字符串
    YT:Z
    MD:Z 代表序列和参考序列错配的字符串
    

    示例:

    HWI-ST170:265:5:44:14178:183344#0 145 1 62421 37 63M1I35M 18 56843949 0 CCTGTATACATAGTAATCAAAGTGTACCACTGGTCGGTGTTTGTGTTCAGGCCCCTGTTGGGTAATGTGCATGTGAAGACCTCAGGTGGTATAGTTTTG CEE?@F@BE@GGEGFBHHEDEEEDEEBEDHHBGHGGFHHDFHHHGGGGFFFEEEHFHFGFHHHHHFHHHFHHHHGHGHEHHHHHHHHHFHHHHHHHHHH RG:Z:DU23M01_Duroc XT:A:U NM:i:4 SM:i:37 AM:i:37 X0:i:1 X1:i:0 XM:i:3 XO:i:1 XG:i:1 MD:Z:20T22C1A52
    HWI-ST170:264:5:61:3024:21492#0 113 1 62421 37 63M1I29M = 6885283 6822868 CCTGTATACATAGTAATCAAAGTGTACCACTGGTCGGTGTTTGTGTTCAGGCCCCTGTTGGGTAATGTGCATGTGAAGACCTCAGGTGGTATA @:;9AFGCHFHHHEGGGHDCADA?E@EEDAHFHHFFHHHFFHHHHHHHHHFHFHDHHHHHHHHGHGHHGHFHHHHHHHFHHHHHHHHHHHHHH RG:Z:DU23M01_Duroc XT:A:U NM:i:4 SM:i:37 AM:i:37 X0:i:1 X1:i:0 XM:i:3 XO:i:1 XG:i:1 MD:Z:20T22C1A46
    
    FCC1L2FACXX:3:2106:15923:93264 99 1 1073 0 100M = 1461 488 TGTGAAGGCCCCCTGCTCTGACTGTGTTAGTGTCCATTTCTCCTTTTACGGTTGTAGCAGTTGCCTTCTACATTGCGGGGATCCTGTATTGGGTGCATGT ___eceeegfggggdgiiifghii[degfhfgfdffhhhfhfghiiighiiH^`Vbgfffihhiiiihhddbdgfgccca][^bbbbbccbca[X^Y_b_ MD:Z:98A1 PG:Z:MarkDuplicatesRG:Z:SRR949625 NM:i:1 AS:i:98 XS:i:98
    FCC1L2FACXX:3:2111:13731:89147 163 1 1073 7 100M = 1438 465 TGTGAAGGCCCCGTGCTCTGACTGTGTTAGTGTCCATTTCTCCTTTTACGGTTGTAGCAGTTGCCTTCTACATTGCGGGGATCCTGTATTGGGTGCATAT bbaeeeeefggggefhiiiihiiicgghhigdehhhiiihiieffhiihihbggdghihfgffhihihf`geed_cecac]accb]_bcccbc^a_bcbb MD:Z:12C87 PG:Z:MarkDuplicatesRG:Z:SRR949625 NM:i:1 AS:i:95 XS:i:95
    

    https://www.jianshu.com/p/c48c36affff7
    https://samtools.github.io/hts-specs/SAMv1.pdf
    https://genome.sph.umich.edu/wiki/SAM
    https://en.wikipedia.org/wiki/SAM_(file_format)
    https://www.biostars.org/p/60765/
    https://www.cnblogs.com/emanlee/p/4316581.html

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