293细胞总结

HEK293细胞系，最全总结

简介：

293细胞的衍生细胞可分为数种，比如293T细胞，293A细胞，293E细胞，293FT细胞等等。有网友总结说，293A是用来包腺病毒的，293T是用来包慢病毒的。总体而言，293细胞容易转染，是实验室最常用的表达兴趣基因的细胞株。

• HEK293：最原始的HEK293细胞来源于一个夭折的人类胚胎肾细胞（1973年）。HEK293细胞是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒DNA（Ad5 DNA）而得到的永生化细胞，表达稳转的Ad5 DNA的基因，不易贴壁，表达E1A蛋白。

• 293T: 293T细胞由HEK293细胞衍生而来，是SV40 large T抗原稳转得到的细胞株，贴壁不牢。293T细胞还表达E1A蛋白，SV40 large T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。293T细胞容易转染，用磷酸钙、PEI或脂质体转染，效率均可达90%以上。除用于基因表达及蛋白生产外，还用于慢病毒、逆转录病毒及腺病毒的包装。

• 293T/17细胞是293T细胞中共转染pBND和pZAP质粒而获得的具有G418耐受的细胞系。该细胞系仍保留高转染效率的特点。

• 293T/17SF细胞是在293T细胞中转入EBV基因形成的转化细胞系，该细胞系主要用于瞬时转染及蛋白表达，类似于293E细胞的作用。

• 293H细胞是293细胞驯化后得到的、能够在无血清培养体系下快速生长、具有高转染效率及高效蛋白表达性能的细胞系。该细胞系贴附牢固，主要用于噬菌斑检测等。

• 293A (adherent)细胞是293细胞的衍生株，倾向于形成单层细胞（monolayer）。在进行病毒滴度测定的空斑试验（plaque assay)时，293A细胞是均匀的单层，没有细胞重叠和间隙。

• 293E细胞是293-H细胞中插入EBNA-1基因的细胞系，该基因能够稳定表达EBV病毒的EBNA1蛋白，含有EBV复制起点（oriP）的重组表达质粒。

• 293-6E细胞是在293-H细胞中插入截短过后的EBNA-1基因的细胞系，其能够在无血清培养基中高表达生产蛋白及病毒载体。293-6E细胞为悬浮状态，主要用于蛋白表达。

• 293F细胞是一类能够在无血清中高表达蛋白的野生型293细胞系（F是Fast-growth的首字母）。

• 293FT细胞是在293F细胞系中插入pCMV-SPORT6-TAg.Neo质粒的转化细胞系，能够快速增殖，易转染，其能够用于慢病毒载体的生产。293FT细胞能制造高滴度慢病毒。

• 293FTM细胞来源于Flp-InTMT-RETM293细胞，该细胞系中稳定转染了ecotropic receptor质粒及MAPPIT (mammalian protein-protein interaction trap)报告质粒。该细胞系主要用于蛋白互作的筛选。

• 293S（suspension）细胞是被驯化成能够悬浮培养且能够耐受低钙离子培养条件的293细胞系。

• 293SG是293S细胞用甲基磺酸乙酯诱变处理，蓖麻毒素选择后再转染pcDNA6/TR质粒得到耐受蓖麻毒素的细胞系。该细胞系为悬浮培养，缺少N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶 (N-acetyl-glucosaminyl transferase I, GnTI）活性，可促进蛋白的Man5GlcNAc2N-聚糖型糖基化修饰。该细胞系常用于同源的N-糖基化蛋白的表达。此外，该细胞系中具有四环素表达抑制基因，可用于四环素诱导的蛋白表达研究。

• 293SGGD细胞系是在293SG转染pcDNA3.1-zeo-STendoT质粒的细胞系，其主要用于糖基化工程研究中。

• 根据各自的用途归纳下来，293细胞主要的细胞系可分为293T细胞-瞬时转染，蛋白表达，293H/A细胞-噬菌斑或空斑实验、293E细胞-重组蛋白的生产、293F细胞-慢病毒的生产和293S细胞-糖基化蛋白的表达。

参考文献： Genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations[J]. Nature communications, 2014, 5: 4767.

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