基于三链形成寡核苷酸(TFO)的抗基因技术已广泛应用于基因特异性调控,是一种潜在的基因治疗方法。TFO骨架和碱基的优化可以显著提高三链DNA的形成和稳定性。氟化在小分子药物开发中广泛应用,但其在TFO优化中的应用尚未得到很好的表征。在此,我们开发了一种“在硅体外-体内”筛选策略,以优化TFO的氟原子(F)取代。分子动力学模拟应用于筛选TFO碱基中的单位点F取代,其与Ets2靶向的双链DNA保持稳定的三重链形成能力。结合现有的核苷酸类似物氟苏啶,通过二合一的化疗TFO实现协同作用,包括基因调节和化疗功能,并通过体外和体内抗肿瘤实验验证了这一点。
其中动物的RNA转染部分是通过英格恩公司的EntransterTM-in vivo RNA来实现。
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