寡核苷酸 (Oligonucleotide)
是一类只有20个以下碱基的短链核苷酸的总称(包括脱氧核糖核酸DNA或核糖核酸RNA内的核苷酸),寡核苷酸可以很容易地和它们的互补对链接,所以常用来作为探针确定DNA或RNA的结构,经常用于基因芯片、电泳、荧光原位杂交等过程中。
寡核苷酸合成的DNA(脱氧核糖核酸)可以用于链聚合反应,能放大确定几乎所有DNA的片段,在这个过程中寡核苷酸是作为引物,和DNA 中标的的互补片段结合,作成DNA的复制品。
调控寡核苷酸用于抑制RNA片段,防止其翻译成蛋白,在制止癌细胞活动方面能起一定的作用。
表达序列标签
表达序列标签从互补DNA(cDNA)分子所测得部分序列的短段DNA(通常300~500bp)。从cDNA文库所得到的许多表达序列标签集合组成表达序列标签数据库,代表在一定的发育时期或特定的环境条件下,特定的组织细胞基因表达的序列。可用于验证基因在特定组织中的表达,推导全长cDNA序列,或作为标签标志基因组中的特殊位点以确定基因的位置等。
原理
EST是从一个随机选择的cDNA 克隆进行5’端和3’端单一次测序获得的短的cDNA 部分序列,代表一个完整基因的一小部分,在数据库中其长度一般从20 到7000bp 不等,平均长度为360 ±120bp 。EST 来源于一定环境下一个组织总mRNA 所构建的cDNA 文库,因此EST也能说明该组织中各基因的表达水平。
技术路线
首先从样品组织中提取mRNA,在逆转录酶的作用下用oligo (dT) 作为引物进行RT -PCR 合成cDNA,再选择合适的载体构建cDNA 文库,对各菌株加以整理,将每一个菌株的插入片段根据载体多克隆位点设计引物进行两端一次性自动化测序,这就是EST 序列的产生过程。
连锁不平衡
连锁不平衡 (linkage disequilibrium)是指在某一群体中,不同座位上某两个基因同时遗传的频率明显高于预期的随机频率的现象。HLA 不同基因座位的各等位基因在人群中以一定的频率出现。简单地说,只要两个基因不是完全独立地遗传,就会表现出某种程度的连锁。这种情况就叫连锁不平衡。连锁不平衡可以是同一条染色体上的不同区域,也可以是不同染色体上的。
拓展看→植物基因组中的连锁不平衡,综述
LTR
LTR(long terminal repeat)即长末端重复序列,是存在于LTR反转录转座子(LTRs)两侧翼的长末端重复序列。
LTR(long terminal repeat)即长末端重复序列,其长度从100bp到5kb不等。是存在于LTR反转录转座子(LTRs)两侧翼的长末端重复序列。LTR反转录转座子和非LTR反转录转座子都是真核生物中一类可移动因子,因其转座需经由RNA介导的反转录过程而得名。LTR反转录转座子一高拷贝在生物界广泛分布,可以通过纵向和横向分别在世代之间和不种间进行传递,同一家族的反转录转座子具有高度的异质性。反转录转座子在一些生物和非生物的逆境条件下可以被激活。利用LTR的特点,基于LTR的分子标记相继发展起来。并且在引物开发、基因作图、生物遗传多样性和系统进化、品种鉴定等方面具有广泛的应用前景。
拓展看→植物活性长末端重复序列反转录转座子研究进展
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