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更准确! | 在笔记本上对重测序数据 Call Indels,提

更准确! | 在笔记本上对重测序数据 Call Indels,提

作者: 生信石头 | 来源:发表于2023-05-04 14:15 被阅读0次

    写在前面

    早前,TBtools 重测序三兄弟插件释放,主要完成了三个事情:

    1. BWA-MEM2 GUI Wrapper 进行读段回贴
    2. SAMTOOLS GUI Wrapper 进行比对结果排序和重复标记
    3. BCFTOOLS GUI Wrapper 进行变异检测和变异过滤

    但是,大伙应该都比较清楚,其实从变异检测准确性的角度来说,GATK是金标准,BCFTOOLS(实际前身是SAMTOOLS)其实没那么准确(或假阳性不低)。当然,在SNP上,其实BCFtools 效果很不错,只是在 INDELs 上表现不佳。具体网络上也有相关评测博文,此处不展开。
    至于如何提高BCFtools变异检测(或者说indels检测)的准确性?可以在软件官网看到,具体提议就还是对有 gap 的位置,进行 realign(参考 GATK3.0,对于GATK4.0 是直接进行局部组装)。而这个策略,其实在另一个软件有所应用,也就是 freebayes。总而言之一句话,如果是对样品进行 indels 检测要求相对高(尤其是我们往往涉及分子标记引物时,关注的就是indels),那么勇 freebayes 或许效果会更好。
    实际上,只要合理调整 freebayes 参数,整体变异检测效果会很不错。毕竟从方法的角度来说,贝叶斯YYDS。
    为此,我决定用 TBtools 的 「CLI Program Wrapper Creator」插件,打包一个「Freebayes GUI Wrapper」插件,以方便大伙使用。

    插件使用

    直接在「Plugin Store」即可找到 Freebayes 插件,点击安装



    安装后,可以直接打开对应插件



    参考非常简单,完全可以参考前述重测序三兄弟流程操作。

    除此之外

    当然,前述重测序三兄弟,SAMTOOLS GUI Wrapper 只能 markdup,没支持 rmdup,现在又补充了这个参数。相信会后续我们要做的事情有不小的帮助。



    有需要的朋友可以更新一下这个插件~

    写在后面

    路漫漫,其修远兮~
    TBtools 的 「CLI Program Wrapper Creator」真的很不错。

    1. 插件开发不到 5 min
    2. 开发界面支持直接运行测试和调整
    3. 支持一键打包导出插件便于分发

    全程不需要一行代码~ 舒适。

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