人胚肾细胞293 [HEK-293]细胞是经人腺病毒5（Ad5）转染而形成的人胚肾细胞永生化细胞系，293细胞包含并表达转染的Ad5基因。
人胚肾细胞293T细胞是293 [HEK-293]细胞株插入了SV40 T-antigen的温度敏感基因形成的高转衍生株，广泛用于病毒包装。其有多种衍生株，比如HEK293，293T/17等，来源都是人胚胎肾细胞，其极少表达细胞外配体所需的内生受体，且比较容易转染，是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株。
人胚肾 293 (HEK 293) 细胞是生物技术和研究中常用的细胞系之一。由于 HEK 293 细胞具有较高的生长效率，通常生成用于生物医学和药物研究的外源性蛋白质。HEK 293细胞 也会被用于各种转染实验中。
细胞形态：上皮细胞样
生长特性：贴壁生长
培养体系：DMEM-H+10%FBS+1%P/S
配套培养基货号：TCH-G101
传代比例：1:4-1:8，每2-3天换液一次
传代周期：24-48 h
培养条件：气相：95%空气+5%CO2，温度：37℃
冻存条件：60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO，液氮储存
推荐海星Hycyte® 一步冻存液（即用型、无血清、无需程序降温）
293T细胞特性
细胞贴壁性较差
对贴壁因子很有要求，最好进行包被；也可以提高血清比例来尝试观察一下；注意板材的亲水性，细胞贴壁疏松，可只用EDTA消化，不要用胰蛋白酶过度消化。
增殖迅速，倍增时间约为20h
细胞增殖非常快，通常倍增时间不到一天，隔天即可长满，融合率不可过高，需要及时传代。
细胞容易聚团
293T细胞培养要点
1. 细胞贴壁性较差，容易飘起来，37℃静置可重新贴壁。换液时注意不要用力摇晃培养瓶，否则有可能会把细胞摇下来。
2. 细胞容易消化，消化下来的细胞容易成团，要吹打吹散。否则传代后细胞会成团生长，不均匀，影响实验结果。
3. 当细胞生长至汇合率达到80~90%需要对细胞进行传代操作，以扩大细胞数量，维持细胞良好的生长状态。
4. 随着传代的次数增加，293T细胞会出现生长状态下降，出现突变等情况。所以要在细胞购进时就进行大量冻存，以保证实验的稳定性和持续性。
293T细胞培养问题与解决办法
细胞聚团严重
1.为啥293T细胞传代后聚团严重？
原因推断：胰酶消化操作不当导致细胞聚团。
● 消化过度或吹打过猛导致细胞受伤严重，破损的细胞碎片容易粘连聚团。
● 消化时细胞融合率太高，成片脱落，将不容易被吹散，容易聚团。
● 鉴于该细胞贴壁疏松，普通0.25%胰酶消化时间控制30s-60s；吹打动作轻柔，充分分散；细胞融合率达到80%-90%即可传代，不可长的太满。
解决办法：鉴于该细胞贴壁疏松，普通0.25%胰酶消化时间控制15s-30s；吹打动作轻柔，控制在10-20次；细胞融合率达到80%传代即可传代，不可长的太满。
2.为啥293T换了血清批次后聚团严重？
原因推断：血清来源于动物，其组成成分有1000种左右，且血清组成及含量常随供血动物的年龄、生理条件和营养条件而异。每个批号的组分百分比含量都是不固定的，所以批间差异是存在的。293T细胞本身有聚团生长特性，但严重聚团可能受到血清里的某些因子刺激。
解决办法：先用血清试用装，试用效果好，可购买和血清试用装批次相同的正装，囤积半年或一年的用量，有效避免批间差对细胞的影响（胎牛血清在-20℃保存可达5年）。
贴壁性差
1. 为什么用了新批号的血清，293T细胞贴壁性变差？
原因推断：血清存在批间差异，而293T细胞本身特点就是贴壁性差，对不同批次的血清适应性不同，就容易出现贴壁疏松现象。
解决办法：可适当加高血清比例（最高不超过20%）；建议试好一个血清批次多囤一些，可以避免血清批间差对细胞的影响。
2. 为啥293T细胞从瓶里（例如T25）铺板到孔里（96孔板），贴壁性变差？
原因推断：排除掉瓶和孔板本身材质或TC（亲水处理）处理因素外，293T细胞贴壁性变差极有可能是因为空间的隔离导致细胞自分泌或旁分泌产生的信号分子浓度太低，不利于细胞的贴壁或增殖。
解决办法：在铺板前，对孔板进行明胶（BI：01-944）包被，可有效促进细胞贴壁。
转染病毒后细胞凋亡严重
1. 为啥293T细胞转染病毒后凋亡严重？
原因推断：在排查了方法步骤和转染试剂，依然没有改善的情况下，可排查一下转染前的营养体系，尤其是血清批间差带来的影响。很多同学说前期培养细胞形态正常呀，其实细胞形态学只是鉴别细胞是否健康的一个外在指标，还要结合细胞其它指标对细胞健康进行评定（比如倍增时间，存活率）。
解决办法：通过更换血清批次，再进行转染实验并观察转染后的效果，比较分析出原因。
293T细胞优势
1.具有一致的结果和细胞具有高度可重复性
2.可以高效地大量生产重组蛋白，使其成为新药开发的主流贡献者。
3.可用于稳定和瞬时基因表达
4.HEK 293 细胞对转染有明显的反应，并且可以在转染中使用不同的化学和物理方法。
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