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一个10分钟的limma包教学视频

一个10分钟的limma包教学视频

作者: 王子威PtaYoth | 来源:发表于2019-12-17 21:31 被阅读0次

内容来自油管上Tanya Ting的‘tutorial for limma’,内容不多但是理清了一些概念
首先是Single Factor Design


Yi为样本i中基因Y的表达

首先需要一个Design Matrix


上图等式的矩阵表达形式
其次需要Contrast Matrix,这里计算T-N,这是我们的contrast of interest
Contrast Matrix

举例:2组3重复的实验

1、制作Design Martix和Contrast Matrix

  • 手动设置Design Matrix和Contrast Matrix


    DM
    CM
  • 利用limma包函数设置DM和CM


    DM,使用model.matrix(~0+sample),这里不需要intercept,不过作者没有作更多解释
CM,使用makeContrast()函数

2、fit Limma

lmFit()拟合线性模型,传递给contrast.fit(),再传递给eBayes()
deg for different expression gene

3、两因素设计

2种处理,3重复共12个样本
不仅要关注处理1的作用,处理2的作用,还要关注处理1和处理2的差异 同样拟合Limma

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