计算DNA溶液中的DNA分子数
比如要解决,有300 ng的5.2-kb质粒。你的质粒有多少 拷贝?
1、先计算分子量(摩尔质量)
单个****DNA bp的平均重量为650道尔顿**。这也可以写为650 g/mol(=摩尔质量)
即,1bp有650Da,或其摩尔质量为650 g/mol ;
因此,任何双链****DNA片段的分子量或摩尔质量都可以通过将其长度(以bp为单位)乘以650来计算,答案将表示为道尔顿或g/mol。
因此,只要我们知道序列长度(即基因组的长度/大小),就知道其片段分子量或其摩尔质量;
比如,5.2kb质粒的分子量是多少?5.2 kb = 5200 bp
计算:5200 bp x 650道尔顿= 3,380,000道尔顿或g/mol
2、计算300 ng 有多少摩尔
300ng/650L10的9次方
*10的9次方 是将g转化为ng
3、计算(300ng/650L )摩尔有多少分子?*
根据阿伏伽德罗数,即6.022 x 10的23次方个分子/摩尔,可以使用以下公式计算每份模板的分子数:
(300ng/650L10的9次方)*6.022 x 10的23次方
简化即,如下公式:
计算公式.png即,有300 ng的5.2kb质粒,你的质粒有多少拷贝数?
质粒分子数.png——总结——
1、即已知DNA片段浓度和体积,就可以计算其DNA片段分子数,公式如下:
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2、由公式可知,相同浓度,不同大小片段,其含的分子数不同,片段越小,分子数越多;片段越大,分子数越少。
3、由以上公式可知,不同DNA浓度与片段长度、分子数相关。
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