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转染实验高频率问答

转染实验高频率问答

作者: 英格恩 | 来源:发表于2022-04-01 09:16 被阅读0次

以英格恩转染试剂为例

Q:  研究某器官是选择尾静脉注射还是局部注射呢?

A:原则是能局部注射就采取局部注射方式。

Q:  局部注射有技巧吗?多少天补注射一次?

A:  局部注射建议多点注射,选择一点扎入针头后,在不拔出针头的情况下,转换针头方向注射,可持续转换2-3个方向,防止拔出针头液体流出。一般2-3天可补注射一次。

Q:  抗生素对转染效率有影响吗?

A:非脂质体转染试剂转染过程可以加抗生素,对转染效率无影响。

Q:  悬浮细胞用R4000转染的话,需要换液吗?试剂对细胞毒性大吗?

A:  根据客户的反馈来看,试剂毒性很小,一般情况可以不换液。但如果需要提取RNA,为保持RNA纯度建议换液。

Q:  Entranster的DNA转染试剂可以用于转染RNA吗?

A:  如果需要DNA和RNA共转,可以选择DNA转染试剂;如果单独转RNA,建议用RNA转染试剂。

Q:想加大注射量,可以加量核酸吗?

A:如果想扩大体系,在增加核酸的同时,需要等比例增加转染试剂用量,在合适的比例下,才能保证转染效率。

Q:  多质粒共转,可以混合注射吗?

A:可以,多质粒共转可按照一定体系混合,根据核酸体积再按比例混和转染试剂即可。

Q:  细胞转染后还需要48h建模,如何控制细胞密度和保证转染效率?

A:  可减少转染的细胞汇合度,转染后续不换液来缩短转染时间。但最好先检测一下转染效率再进行下一步实验。

Q:  细胞转染可以带抗体转染吗?会影响干扰效率吗?

A:   可以带抗体转染,影响大小因抗体和浓度有差异。

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