与高通量测序的区别?
一般而言,高通量测序需要从大量细胞中获取足够的DNA样品,因此,测序结果是这些细胞的“平均值”,“整体”的表现。但是由于细胞异质性,相同表型的细胞的遗传信息可能存在显著差异性,一些低丰度的信息会被整体表现所掩盖。
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由于是单细胞测序,所以得到的DNA量很小,但又要构建文库来测序,所以需要对起始核酸进行数十万倍的扩增,如何避免核酸丢失、扩增偏差、提高技术的灵敏度和可重复性是技术上要解决的问题。技术的可重复、自动化、规模化是难点。
1 单细胞基因组测序方法
Malbac方法,Mda方法
2 单细胞转录组测序方法
Smart扩增技术:mRNA,没有分子标签功能
10×genomics技术:mRNA,有分子标签功能
Andeplete技术:能同时得到mRNA和LncRNA的信息
应用
1 对各种组织器官的发育过程进行单细胞转录组分析,发现新的细胞类型和标记基因;
2 与迅速发展的基因组编辑技术结合,对复杂的转录调控网络进行单细胞分辨率分析;
3 研究作物受到各种胁迫后在细胞层面的反应,将其正常细胞和受诱导的细胞单独分离出来测序,有助于发现一些关键基因。
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