在科研中,小白鼠是实验中常用的模式动物,研究它的粪便时该如何收集样本?
一、小鼠粪便采样总体原则
1)采集容器应干净无菌;
2)采集器具应使用一次性无菌用品;
3)可以采用应激排便收集粪便;
4)采集的粪便应收集于带盖无菌离心管内;
5)收集的样本应立即-80℃保存(收集的样本可置于干冰上转移至-80℃),干冰运输;
6)粪便样本采集在一天的同一时段进行(最好是早晨),避免微生物组成在同一天不同时间内发生变化。
方法一:代谢笼收集粪便(资料来源:BIOVANO CHINA)
代谢笼:粪尿分离装置。用于收集实验动物自然排出的尿液,是一种特殊设计的为采集实验动物各种排泄物质的密封式饲养笼。除了尿液外,通过特殊设计可以收集粪便、采集呼出的二氧化碳。
代谢笼示意图a)代谢笼粪尿分离原理
——粪尿分离漏斗
粪尿分离漏斗示意图b)适用领域
1)生物化学
2)生理学
3)营养学
4)药代动力学
5)毒理学
c)收集效果图
收集效果示意图d)使用代谢笼的优势
1)所有关键部件均为疏水性聚甲基戊烯(PMP)材料,确保完全分离,不挂壁;
2)可长时间收集(24~48小时)独特的漏斗和锥形体设计,可以将粪便和尿液分离收集到笼外的收集管中,不会互相污染,因此分离是直接和完全的。集尿管有防蒸发设计,单个小鼠也可以收集。
e)使用代谢笼的劣势
1)采集装置成本过高;
2)仅为采集粪便,大材小用;
3)适用于同时有其他领域(毒理学、生化、营养、生理)研究需求的人使用。
方法二、应激性排便
采集步骤:
1)固定小鼠,将其尾部提起;
2)用手指轻轻按压小鼠下腹部;
3)收集新鲜粪便于对应编号的若干无菌EP管中;
4)每管分装2-3颗;
5)-80℃保存,干冰运输。
方法三、自然排便
准备材料:
1)无菌牙签或镊子;
2)高压灭菌后的微隔离器空笼子或无菌干净的小鼠笼子;
3)1.5mL无菌EP管。
采集步骤:
1)贴标签并标记(针对每一只大鼠&小鼠);
样本ID;处理组别;其他需要关联该样本的信息
2)将个体小鼠放置于高压灭菌或无菌的小鼠笼子中(无需垫料);
3)允许大鼠和小鼠自然排便,用牙签或无菌镊子收集排出粪便于1.5mL无菌EP管中,小心闭合管盖,更换牙签或镊子进行下一次采样,直至所有老鼠粪便收集完成;
4)带有粪便的管子立即至于-80℃ 保存,并可长期保存;
5)需要长途运输样本,采用足够的干冰进行运输,确保样本始终处于冷冻状态。
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