第三节—培养基的制备方法及注意事项

现在我们来学习新的一节培养基的制备方法及注意事项：

第一点是：容器使用前要清洗干净并烘干，一般用的是玻璃器皿，不可以用金属材质的器皿，因为防止金属物质与培养基中的成分反应产生有害物质

第二点：pH—灭菌前后都需要测定pH，允许的变化范围一般无特殊规定下在±0.2之间

第三点：分装—培养基灭菌完后需要分装

第四点：灭菌—根据培养基里成分不同用不同的灭菌方式，一般用的是流通蒸汽灭菌，培养基里有糖类物质，因为糖在高温下很容易分解，灭菌时一般采用的是高压蒸汽灭菌，121℃15分钟。有些物质不能承受121℃的高温，用的是间歇式灭菌法，采用100℃的流通蒸汽分三天灭菌，每次30min

第五点：保存—配置好的培养基保存在2~25℃的避光密闭环境中

现在介绍一下干燥培养基，就是我们实验室用的经过脱水处理后的干粉培养基，需要用时就按照比例加水就行了，不过每次购买回来一批新的培养基都需要做适用性检查，检查包括灵敏度和无菌检查。灵敏度检查是检验培养基的质量，无菌性检查是检验灭菌效果

现在介绍一下干燥培养基的脱水方法

1：真空法：先把液体培养基浓缩后放入真空干燥器内干燥，然后研磨分装。原理是在真空中的物料被加热，水变成蒸汽挥发然后由仪器收集后排出

2：喷雾法：先把培养基制备成液体后经过喷雾干燥后分装。原理是空气经过加热后进入干燥室，物料被喷雾机喷成很小的液体水珠，水珠与热蒸汽相遇后马上就变成水蒸气蒸发了，物料就变成粉末掉下来被收集在特定容器中被送出

3：烘干法：加入少量水后使培养基溶解，再加入琼脂使其凝固在一起后放在烘箱中去除水分

球磨法：先将各组分分别干燥完后混合再用球磨机研磨分装

好了总结一下这节的内容：

这节主要介绍了干粉培养基的干燥方法，分别是真空干燥法，烘干法，喷雾法和球磨法，本质上都是利用热能使水变成水蒸气后形成的干粉培养基；还有培养基的制备方法，首先是容器的选择，配置好后需要测量pH，灭菌分装，保存。使用前需要做培养基适用性检查，在实验中用到的试剂都必须是化学纯以上