Sequencing Saturation 是指在高通量测序中,当样本中的 DNA序列被读取的次数越来越多时,测序数据的增加量逐渐减少,直到趋于饱和状态。这是因为每个DNA分子只能够被读取一定次数,超过这个次数后,再读取就不会再增加数据量了。
这个现象会影响到数据的可靠性和准确性,因为在饱和状态下,数据的覆盖度会变得不均匀,有些区域会被过度覆盖,而其他区域则会被低覆盖,这可能导致一些变异或重要的序列片段被遗漏或者错误地解读。
以下是一些关于 Sequencing Saturation 的链接:
- https://www.nature.com/articles/srep39335
- https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6178649/
- https://www.illumina.com/science/sequencing-method-explorer/kits-and-arrays/sequencing-saturation.html
如果 Sequencing Saturation 是代码相关的问题,代码如下:
#计算测序数据的饱和度
import pysam
import numpy as np
#读取 BAM/SAM 文件
samfile = pysam.AlignmentFile("example.bam", "rb")
#统计每个位置上的覆盖度
coverage = np.zeros(samfile.lengths[0])
for pileupcolumn in samfile.pileup():
coverage[pileupcolumn.pos] = pileupcolumn.nsegments
#计算饱和度
total_reads = samfile.mapped
saturation = np.cumsum(sorted(coverage, reverse=True)) / float(total_reads)
#绘制饱和度曲线
import matplotlib.pyplot as plt
plt.plot(saturation)
plt.xlabel("Number of reads")
plt.ylabel("Saturation")
plt.show()
这段代码可以计算 BAM/SAM 文件中每个位置的覆盖度,并绘制饱和度曲线。
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