首先确定酶切位点是否甲基化，甲基化一般常见有Dam（GmATC），Dcm（CmWGG，W=A或T）和CpG（mCG），在酶切位点选择时尽量避免如：XbaI（TCTAGA）（Dam）,ClaI（ATCGAT），BclI（TGATCA），ApaI（GGWCC），SfiI（GGCCNNNNNGGCC），StuI（AGGCCT）等位点切割；无法避免这类酶切位点的，需将质粒转化甲基化缺陷型的细胞再抽提制备质粒，常用的Dam-/Dcm-细胞如：GM2163（E4105S），ER2925，JM110等。
首先确定酶切位点是否甲基化，甲基化一般常见有Dam（GmATC），Dcm（CmWGG，W=A或T）和CpG（mCG），在酶切位点选择时尽量避免如：XbaI（TCTAGA）（Dam）,ClaI（ATCGAT），BclI（TGATCA），ApaI（GGWCC），SfiI（GGCCNNNNNGGCC），StuI（AGGCCT）等位点切割；无法避免这类酶切位点的，需将质粒转化甲基化缺陷型的细胞再抽提制备质粒，常用的Dam-/Dcm-细胞如：GM2163（E4105S），ER2925，JM110等。
首先确定酶切位点是否甲基化，甲基化一般常见有Dam（GmATC），Dcm（CmWGG，W=A或T）和CpG（mCG...
“SnapGene是构建质粒的利器。” 前面介绍了利用双酶切方法将目的基因连接到EGFP质粒中构建荧光质粒。但是双...
第一次看到以下这种质粒map的时候，我的脑袋是空白的，最近在师兄的指导下，也做了一些转化、扩增、提质粒、酶切和连接...
按照实验需求，质粒构建分为克隆质粒，表达质粒，基因敲除质粒，报告质粒，病毒质粒，基因组工程质粒等。 这部...
【案例】 使用双酶切的方式将一段基因序列插入pDsRed2-N1质粒中，使其能够与DsRED蛋白进行融合表达。 【...
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“SnapGene是构建质粒的利器。” 上次介绍了双酶切克隆和TA克隆，这次介绍一种和TA克隆比较相似的TOPO克...
PCR或者分子克隆技术（即基于E.coli等进行的重组质粒构建）可以实现dsDNA的大量扩增，而基于切口酶的序列特...
质粒解剖 质粒四大要素： 一、复制起点：控制着质粒的复制，并决定了质粒的宿主和拷贝数； Ori 是质粒的复制起点（...
腹胀的原因？。 如果你胃中缺乏为盐酸或者位置胃只能分泌很少的消化酶，那么很多酵母都无法...
本文标题：酶无法切开质粒是什么原因
本文链接：https://www.haomeiwen.com/subject/wvcotltx.html
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