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质粒图谱4大要素

质粒图谱4大要素

作者: 无名氏倾倒箱 | 来源:发表于2022-07-05 23:57 被阅读0次

质粒解剖

质粒四大要素:

一、复制起点:控制着质粒的复制,并决定了质粒的宿主和拷贝数;

Ori 是质粒的复制起点(也称 origin ), ori 和它所控制的组分一起称为一个复制子, ori 调控整个质粒在大肠杆菌中滚环式复制,使得质粒可以得到大量扩增

质粒中有两个 origin 的,为穿梭质粒,既可以在原核细胞复制,也可在真核细胞中复制。

二、筛选标记:多为抗性基因,以便加以检测筛选;

只存在单抗性的质粒多为原核克隆载体
和原核表达载体。

而存在两种或以上的抗性的多为真核表达质粒,多为穿梭质粒

真核表达质粒不仅含 如AmpR ,还有如NeoR 筛选标记

三、多克隆位点:外源基因的插入位点;

多克隆位点简称 MCS ,图谱中的 MCS 区
或者许多内切酶集中的部分,就是质粒的多克隆位点,它一般位于转录启动和转录终止信号之间

多克隆位点是外源 DNA 的插入位点,一般可通过酶切后连接的方式将外源 DNA 插入质粒

四、其他件:如转录调控元件、翻译表达元件和蛋白标签等

质粒中除了复制起始位点、筛选标记、多克隆位点外,还具有其他一些表达或调控元件,

如,转录调控元件(启动子),

翻译调控元件

融合表达标签蛋白等

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