Data:from GEO
Tools: RSEM和STAR
建立索引:下载gencode参考数据集,v24的gtf文件以及fasta文件
/home/wuxiaobin/RSEM/bin/rsem-prepare-reference —gtf ~/gene_annotation/gencode.vM24.annotation.gtf --star ~/gene_annotation/GRCm38.primary_assembly.genome.fa ~/second_object/mus_ref/mus_gencode
调用star,建立m38的索引。
计算表达量:
~/RSEM/bin/rsem-calculate-expression --star -p 10 --output-genome-bam ~/second_object/rna_seq_mouse/SRR7912011.fastq ~/second_object/mus_ref/mus_gencode ./mus38_gencode
得到有基于基因和转录组的表达文件
ID转换:
对得到的genes result的基因ID进行转换,用gprofiler将ensemble ID 转换为gene symbol
创建ID 与 TPM表达量文件.
tips(建议不指定输出bam文件,节省时间和资源)
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