干细胞 100问（之一）

干细胞 100问（之一）

1.什么是干细胞？

答：干细胞是能够长期存活，具有不断的自我繁殖能力和多向化潜能，能分化发育成血液、肌肉、神经、心脏等不同组织和器官，是形成人体各种组织器官的祖宗细胞。

2.干细胞有哪些种类？

答：根据来源，干细胞可以分为胚胎干细胞、成体干细胞、诱导多能干细胞（iPS细胞），（这种分类有专家称为是根据干细胞在人体所处阶段的分类）。成体干细胞是指，来源于胚胎三胚层形成之后直至死亡，人体组织中的各种干细胞，包括脐带血干细胞、骨髓干细胞、外周血干细胞、心肌干细胞、脂肪干细胞、间充质干细胞等。间充质干细胞(MSCs)是属于中胚层的一类多能干细胞，主要存在于结缔组织和器官间质中。根据来源不同分为：骨髓间充质干细胞、脐血间充质干细胞和外周血间充质干细胞等。

3.干细胞有什么特性？

答：干细胞表现出三种生物学特性：

（1）长期存活。不论在体内还是体外培养都能表现为长期存活，不断地自我繁殖。只有长期存活，才能用于临床治疗。

（2）可塑性。成体干细胞的可以跨系跨胚层分化为所有的组织细胞类型的特性，称为可塑性。这是成体干细胞能够治疗各种细胞损伤性疾病的理论基础。

（3）化学趋向性。由于成体干细胞具有特殊的生物学多样性，特别是多相分化潜能，而且成体干细胞的转分化常发生在病理情况下，干细胞是向病理部位迁移，成为病理部位的前体细胞，并分化为终末成熟细胞。干细胞向病理部位迁移的特性，称为化学趋向性。

4.临床治疗上的来源，及哪种干细胞最好？

主要包括：脐带血来源的干细胞、骨髓血来源的干细胞。此外脐带及胎盘组织、脂肪组织等也是重要的干细胞来源。

骨髓中的干细胞比外周血的干细胞原始。脐带血比骨髓更为原始。脐带血的干细胞自我繁殖能力最强。繁殖速度最快。骨髓次之。脐带血中干细胞的比率最大，骨髓次之。外周血中的干细胞更接近终端细胞或叫祖细胞或前体细胞。

5.干细胞能够治病的机理是什么？

目前已知的干细胞治疗疾病的机理包括：

替代和修复死亡和受损伤的细胞

激活休眠和处于抑制状态的细胞

免疫调控机制促进细胞间电能力、电传导的恢复（如间充质干细胞分泌连接蛋白帮助细胞间连接、促进离子通道的开放等）

6.目前干细胞能够治疗哪些疾病？

截至 2009年底，干细胞能够治疗的适应症达到  61种，其中绝大多数是临床上难以治愈的细胞损伤性疾病。

7.干细胞治疗的有什么优势？

干细胞治疗，相对于传统的药物治疗、手术治疗具有显著的优点。

首先，干细胞的治疗范围广阔，且无任何毒性、避免排斥；

其次，干细胞治疗可以一次性介入，永久性治疗；

第三，干细胞的治疗无须深入了解疾病的致病机理，且治疗材料来源充足。可以说是最好的免疫治疗和基因治疗载体。

8.干细胞移植相对禁忌证

①高度过敏体质或者有严重过敏史者。

②合并恶性肿瘤。

③全身感染或局部严重感染。

④并发心、肺、肝、肾等重要脏器的功能障碍。

⑤凝血功能障碍，如血友病。

⑥血清学检查阳性者，如艾滋病、乙肝、梅毒等。

9.脐血干细胞供体（母体）要注意哪几项？

1)母体产前用  ELISA方法常规进行检测主要是法定四项传染病 ,包括艾滋病（H  I VAb/Ag,）、乙型肝炎（HBs Ag）、丙型肝炎（抗 HCV， HCVAg）、梅毒（TP）。

2 )产妇的健康检查，没有遗传病。

10.骨髓、脐带血干细胞分离制备后的检测

（1、骨髓、脐血干/祖细胞数量检测：一是血细胞计数板计数，二是血常规计数仪计数单个核细胞总数；

（2、细胞存活率检测  ,使用苔盼蓝染色法计数活细胞数目。

（3、使用流式细胞计数仪计数 CD105+干细胞、CD34+干细胞、CD133等干细胞数量。

11.脐带血与骨髓血相比有哪些优势？

脐带血是胎儿娩出、脐带结扎并离断后残留在胎盘和脐带中的血液。脐带血具有干细胞来源丰富、对供者无不良影响、配型相合程度要求低、传染病毒风险低、移植后严重排斥发生率较低以及实物储存能够随时获得等优点。

（1）脐血干细胞来源丰富，相对自体骨髓干细胞，脐血干细胞采集方便，受感染几率减少。

（2）脐带血细胞免疫性不成熟，其中的  T淋巴细胞表型及功能均为不成熟表现 ，人类白细胞抗原Ⅱ(HLA2Ⅱ)类抗原表达率低，几乎没有抗体,移植过程中不需要严格配型，移植后排异反应弱或不出现，  GVHD出现少、且轻;

（3）脐带血干细胞比外周血干细胞和骨髓干细胞更为原始,其自我繁殖能力最强  ,繁殖速度最快。

12.脐带血干细胞制剂体外分离纯化的标准化作业程序(  SOP)是什么？

包括从临床干细胞治疗体外分离的申请到干细胞移植后不良反应回报的整个治疗过程。制定了质量手册，程序文件，管理文件以及各种记录表格。科室设置了百级层流实验室，配置了低温低速离心机等细胞分离设备，建立了细胞分离实验室。当临床科室有需要细胞治疗的病例时，在完成医院伦理委员会初步审核后，填写《干细胞  /祖细胞体外分离申请单》和《干细胞治疗知情同意书》后，即可按  SOP进行干细胞制剂的制备。患者同时做术前准备，干细胞制剂准备完成后立即局部移植给患者以达到细胞治疗的目的。

13.国家对干细胞治疗的政策如何？

中国政府对干细胞科研和临床治疗持明确支持态度。2009年  3月 2日卫生部颁布了《医疗技术临床应用管理办法》，管理办法将自体干细胞和免疫细胞治疗技术、异基因干细胞移植技术纳入第三类医疗技术管理（异基因干细胞移植是指非自体的由他人提供的干细胞移植），并规定异种干细胞移植暂不得应用于临床（即人以外其它动物来源干细胞不得应用于临床）。2009年温家宝总理在全国新兴战略产业座谈会上指出“干细胞研究促进了再生医学的发展，这是继药物治疗、手术治疗之后的又一场医疗革命。我们要力争在干细胞研究的更多领域取得领先地位，同时要高度重视、切实防范干细胞研究引发的伦理问题。2010年  8月 20日温家宝总理在深圳视察讲话时再次指出：“干细胞研究是生物科技的最前沿,是最有希望超越西方发达国家的领域。让一个国家、一个民族在一个大的科学领域领先世界！”

二. I型及 II型糖尿病

14.干细胞能治疗糖尿病吗？

回答是肯定的，能治疗！

因为糖尿病的病理解剖表现为细胞损伤性疾病。而干细胞生物学特性就是修复体内受损的组织和细胞。所以干细胞治疗给糖尿病人多了一种选择；给了一个治疗的机会；给医生多了一种治疗的方案。

15.为什么能治？

I型糖尿病(TlDM)是一种  T细胞介导的自身免疫性疾病，选择性破坏胰腺β细胞，导致患者体内胰岛素分泌绝对不足。干细胞以其极强的自我更新能力及多向分化潜能成为获得大量胰岛β细胞的最佳种子细胞来源。

1型糖尿病病理解剖呈现为胰岛炎，胰岛数量减少，β细胞数量减少，提示是绝对性胰岛素缺乏。

2型糖尿病病友体内产生胰岛素的能力并非完全丧失，有的患者体内胰岛素甚至产生过多，但胰岛素的作用效果却大打折扣，因此患者体内的胰岛素可能处于一种相对缺乏的状态。可以通过某些口服药物刺激体内胰岛素的分泌。但到后期仍有部分病人需要像  1型糖尿病那样进行胰岛素治疗。

2型糖尿病病理解剖多数是胰岛纤维化，胰腺泡纤维化，胰腺内血管硬化。（所以提示Ⅰ型、Ⅱ型糖尿病均为细胞损伤性疾病），干细胞以其极强的自我更新能力及多向分化潜能成为获得大量胰岛β细胞的最佳种子细胞来源。目前已证实人骨髓干细胞、脐带血干细胞可以分化为胰岛素分泌细胞。

治疗糖尿病机制包括：（1）胰岛β细胞替代（2）分泌生物活性物质修复受损胰岛（3）促进新生血管形成（4）免疫调节作用。

16.怎么样治疗？

常用的治疗是方法（1）经皮胰动脉干细胞灌注（也叫胰动脉介入治疗，一般自身骨髓干细胞全部采用胰动脉介入治疗）；（2）经静脉干细胞输注；（3）经胰动脉联合经静脉干细胞输注。

（1）第一次治疗首选动脉介入，第二、第三次多选择静脉；

（2）凡是自身骨髓干细胞全部选择胰动脉介入；

（3）脐带血干细胞静脉输注。

17.治疗时间（干细胞治疗糖尿病的疗程）

干细胞治疗糖尿病的疗程，根据众多临床医学家总结的经验，一般一个疗程需要2—4次干细胞治疗。第一治疗后2-4周做第二次治疗，第二次后间隔3个月做第三次治疗；再间隔半年做第四次治疗，这样疗效才能稳定。也有的专家选择胰动脉介入联合经静脉输注干细胞治疗：完成经皮胰动脉干细胞灌注后1周左右，行经静脉干细胞输注，5-7天输注一次，共3次，酌情增减。也有的专家采用一个疗程需要 2—4次干细胞治疗，静脉干细胞输注：每两周输注 1次，共 3次，依据病人状况可酌情增减。

18.治疗能达到什么样的效果，有效率

症状改善指标：（1）减少或停用胰岛素；（2）高血糖发作频率下降；（3）C肽水平升高；（3）生活质量显著提高。

有效率：术后 7-10天，在维持原有胰岛素用量不变的情况下，患者出现低血糖症状（88.2%），

开始胰岛素减量；治疗满 6个月以上患者，C肽水平多数升高（77.7%），胰岛素持续减量。多数患者 2周起效，且有低血糖表现。口服降糖药 OAD及胰岛素用量减少，胰岛功能改善及血糖改善好转率 63%左右。通过自体骨髓干细胞移植来治疗糖尿病是目前的国际前沿技术，国外医学证明，患者手术后胰岛功能恢复的有效率达  90%以上。国内目前的有效率在 60%~90%左右。

19.安全性、适应症与禁忌症

安全性：应用干细胞治疗 T1DM是安全的，短期内取得较好的临床效果。极少患者出现短时低热或皮疹，对症或抗过敏治疗后症状消失。1例移植  8月出现肾病综合症，肾活检显示微小病变，激素治疗明显好转，与移植无关。

适应症：明确诊断为 T1DM患者；造血功能正常；无严重呼吸、循环系统疾患；无明显肝肾功能异常；近期无严重感染。对年龄在５０岁以下或者初发的  1型糖尿病患者，采用这项新的治疗方法效果最好。

20.干细胞治疗的优势在哪里？

正常成人胰腺中含有 10个β细胞，β细胞通过不断的凋亡与增殖来维持其数量的动态平衡。对于糖尿病患者来说，这种平衡完全被打乱，保护残存细胞及补充足够数量的β细胞是糖尿病细胞治疗的重点。干细胞治疗作为一种治疗疾病的新方法，能够从细胞和基因水平治疗糖尿病，达到临床上的治愈。干细胞以其极强的自我更新能力及多向分化潜能无疑成为获得大量胰岛β细胞的最佳种子细胞。这种全新的治疗手段还克服了异体胰岛移植治疗糖尿病带来的供体稀缺、免疫排斥和费用高昂的弊端。有望摆脱长期糖尿病潜在的多种并发症对健康的威胁。病人停用胰岛素后，对病人生活质量提来的巨大提高。