首先:告诫自己做人
与人说话,要得体,对待长辈要尊敬,不要带着情绪跟别人说话,只有良好的沟通才能解决问题
万不可说话,那怕说有事,不说话,沉默,也不能说谎欺骗,接口,满口胡编乱造。
踏踏实实做事情,不要抱怨,不要去大庭广众让别人难堪,做人要诚恳
最重要的是欺骗自己,让自己去成长
Those time you get up early you work hard,those time you stay up late you work hard,those time when you don't feel like working ,you're too tired,you don't want to push yourself but you do it anyway.That's actually the dream.That's the dream.It's not the destination.It's the journey.If you guys can understand that.Then you will see what happen. It's that you won't accomplish your dream your dream won't come true.Something greater well.

摘要:对植物来说,光是一个重要的外部信号,它促进了气孔发育和主气孔调节基因(SPCH)的积累。然而,光信号如何影响SPCH仍然是未知的。本研究表明,光调控转录因子拉长下胚轴5 (ELONGATED HYPOCOTYL 5, HY5)是光形态生长的关键调控因子,存在于叶肉细胞内部,并直接结合和激活气孔原。气孔原(STOMAGEN)是叶肉来源的分泌肽,能够稳定表皮中SPCH,从而促进气孔产生。我们的工作确定了光信号和气孔发育之间的分子联系,跨越两个组织层,强调了环境信号因子如何协调不同组织类型的生长
提问?HY5如何响应光形态?通过什么复合体什么方式激活气孔原?HY5是否与SPCH互作?光信号到气孔产生,跨越哪两个组织?怎么理解?
背景部分
1:气孔发育的可塑性,在模式植物拟南芥中,对气孔保卫细胞数量的调节需要对一个特殊的表皮谱系(气孔谱系)进行发育控制。由于其对一系列外部刺激的响应和叶片表面的可达性,该谱系也为研究发育可塑性提供了一个强大的平台。当拟分生细胞母细胞(MMC)不对称分裂时,产生较小的分生细胞样细胞(A)和较大的气孔谱系基细胞(SLGC):分生细胞样细胞(A)可以自我更新,但最终分化为保护母细胞(GMC),最后分裂为一对保护细胞。而较大的气孔谱系基细胞(SLGC)除了分化为表皮细胞外,SLGC还可以进行不对称的细胞分裂,产生分生分生细胞样细胞(A)和另一个SLGC,从而循环往复。因此,气孔前体(mmc)和分生细胞样细胞(A)的活性决定了细胞系的扩张与否,并为表皮上的守卫细胞和铺路细胞的产生提供了灵活性
2:

位于叶组织内部的叶肉细胞也可以通过旁分泌信号影响气孔前体。STOMAGEN(或EPFL9)是EPF家族的另一个成员,由叶肉细胞产生,但与EPF2相比,它促进SPCH积累和气孔发育。STOMAGEN干扰EPF2与ER-TMM受体的结合,从而减轻SPCH上抑制性MAPK级联反应的活性。
3:bZIP转录因子拉长型下胚轴5(ELONGATED HYPOCOTYL 5, HY5)是光信号转导的中心成分,在促进光形态发生生长中发挥着重要作用。在黑暗中,泛素E3连接酶(COP1)靶向降解HY5,光照条件下COP1失活导致HY5在光照下积累。此外,光还诱导HY5的转录,抑制HY5蛋白的抑制性磷酸化。因此,HY5水平与光强成正比,并与光形态生长的程度相关
4:光照对气孔的发育也有影响。在黑暗条件下,为了节约水分,气孔发育受到抑制,而光照条件下,以强度依赖的方式触发气孔产生以吸收碳并促进SPCH积累。遗传研究表明,SPCH通过一种未知的机制被COP1抑制,并最终激活抑制性YDA模块(这个部分解释的通,看上面图)。光信号如何与SPCH联系并动态地诱导气孔产生仍然是未知的。
总结:在这里,我们发现HY5在光调控气孔发育中起关键作用。通过遗传和显微分析表明,HY5是气孔发育过程中光响应所必需的,并影响光下SPCH的积累。我们还发现HY5在叶肉中与stomagen共表达,它直接与stomagen的启动子结合并诱导其表达(这个部分??共表达,验证?)。我们进一步发现叶肉特异性HY5促进气孔发育。最后,我们证明了stomageni在光调控气孔产生中很重要,它在HY5的下游介导了这种反应。基于我们的数据,我们得出结论,光信号通过HY5调节stomagen1水平,这使得气孔产生对光的可塑性,而HY5-stomagen模块可能代表了光信号调节SPCH缺失的环节。此外,由于叶肉细胞是光合作用的主力细胞,这个模块可以使这些内部组织的细胞在光激活时,向表皮上的气孔产生发出信号,以便吸收碳。
结论1光照下HY5对气孔发育有促进作用(看到这,怎么去验证?有无光和有无HY5下气孔的发育差异?)
对不同hy5水平(原因是光强不同)的拟南芥的气孔发育进行了详细的分析:
得证明两点:HY5能影响气孔发育(aa,AA,OE),光照同时也能影响气孔发育(WT)
OE条件下,SD多,说明HY5相对于光照对气孔影响更强。

d图用共聚焦显微镜观察了拟南芥早期3d苗叶片背面的气孔情况,找到了气孔发育早期的谱系细胞。通过观察不同突变体在不同光强下面的细胞发育情况,aa在不同光强下sd发育很差,而OE在不同光强发育很多,说明HY5在发育早期影响,作用很强,这里我想问问暗处理下,OE 是否能SD增加。以此证明HY5能否独立光照还是依赖光照影响气孔。
结论2 hy5促进了SPCH的光依赖积累?
SPCH在不同情况的表达量?HY5和SPCH 是否有互作?
SPCHpro:SPCH-CFP用这个报告基因看SPCH的表达量,hy5-aa 突变体中SPCH表达降低,说明HY5在SPCH上游

结论三 HY5上调了stomagen(叶肉源性分泌肽)的表达。

为了研究hy5对stomagen1表达的影响,我们首先通过RT-qPCR检测了WT、hy5功能缺失突变体和hy5 - ox5的stomagen1转录本水平。与WT相比,两个hy5mutant(hy5-215和hy5-51)在光照下生长时的stomagen表达量减少了约20%。然后证明HY5正调控
结论四 HY5在叶肉中表达,并以依赖光的方式直接与stomagen结合

结论五 叶肉源的HY5能充分促进光诱导的气孔发育。
结论六 STOMAGEN在hy5介导的气孔发育中起重要作用。
最终结论就在这个通路图

网友评论