问题背景:
我现在有几百个同一菌株的基因组,但是我只需要差别较大的样品去做后续分析,我要把相似的冗余样品去掉那么我该怎么办呢?直接用mega构建进化树是不可行的,因为基因组太大,分析不出来。我把这些样品中的一个样品作为参考基因组,将剩余样品比对到这个样品上,然后call SNP,最终得到数百个vcf文件,这些vcf文件包含了这些样品相对于参考基因组的SNP,写一个脚本将这些SNP分别连接起来作为一条序列,所有序列输出为一个fasta文件,再用mega构建进化树就可以了!
以下是python代码
#Pyvcf是python专门处理vcf文件的一个包
import vcf
import os
import numpy
import collections
#vcf文件所在的路径
filepath=r'C:\Users\18019\Desktop\VCF\Vibrio.VCF'
filelist=os.listdir(filepath)
output_name=[]
for ech in filelist:
output_name.append(ech.replace('_',''))
output_name+=['VibrioFF75']
dicREF_list=[]
dicALT_list=[]
for ech in filelist:
ech_vcf=vcf.Reader(filename=r'C:\Users\18019\Desktop\VCF\Vibrio.VCF\%s' % ech)
dicREF,dicALT={},{}
for SNP in ech_vcf:
if SNP.is_snp == 1:
dicREF[SNP.CHROM + '_' + str(SNP.POS)] = SNP.REF
if len(SNP.ALT) > 1:
dicALT[SNP.CHROM + '_' + str(SNP.POS)] = SNP.ALT[0]
else:
dicALT[SNP.CHROM + '_' + str(SNP.POS)] = SNP.ALT
dicREF_list.append(dicREF)
dicALT_list.append(dicALT)
#求出所有vcf文件中snp的位点
SNP_REF={}
for i in dicREF_list:
SNP_REF=dict(SNP_REF,**i)
pos_list=list(SNP_REF.keys())
pos_list.sort()
print(len(pos_list))
#将每个vcf中的snp连接起来,如果该位点存在突变,则输出ALT,否则输出REF,保证每条SNP序列长度相同
all_list=[]
for ech_dic in dicALT_list:
ech_dic_index = dicALT_list.index(ech_dic)
ech_name=output_name[ech_dic_index]
ech_list=[]
for pos in pos_list:
if pos in ech_dic:
theSNP = str(ech_dic[pos]).replace('[', '').replace(']', '')
ech_list.append(theSNP)
else:
theSNP = str(SNP_REF[pos]).replace('[', '').replace(']', '')
ech_list.append(theSNP)
all_list.append(ech_list)
#如果将SNP连接起来的序列还是过长,则需要进行二次过滤
snp_array=[]
for pos in pos_list:
theSNP=str(SNP_REF[pos]).replace('[','').replace(']','')
snp_array.append(theSNP)
for i in all_list:
snp_array=numpy.row_stack((snp_array,i))
snp_array=numpy.transpose(snp_array)
array_len=len(snp_array)
print(array_len)
snp_least=[]
i=0
while i<array_len:
snp_least.append(collections.Counter(snp_array[i]).most_common()[-1])
i=i+1
print(len(snp_least))
pos_index=0
pos_index_list=[]
while pos_index<array_len:
if ((snp_least[pos_index][1]) < 5):#5为阈值,如果snp只有5个以内的样品存在则将这个位点过滤掉
pos_index_list.append(pos_index)
pos_index=pos_index+1
print(len(pos_index_list))
for pos_index in pos_index_list:
pos_list[pos_index]='0'
pos_list=set(pos_list)
pos_list=list(pos_list)
test_list=pos_list[:]
for i in pos_list:
if i=='0':
test_list.remove(i)
pos_list=test_list
print(len(pos_list))
allStr=''
for ech_dic in dicALT_list:
ech_dic_index=dicALT_list.index(ech_dic)
ech_name=output_name[ech_dic_index]
ech_Str='>'+ech_name+'\n'
for pos in pos_list:
if pos in ech_dic:
theSNP = str(ech_dic[pos]).replace('[', '').replace(']', '')
ech_Str += theSNP
else:
theSNP = str(SNP_REF[pos]).replace('[', '').replace(']', '')
ech_Str += theSNP
ech_Str+='\n'
allStr+=ech_Str
allStr+='>'+output_name[-1]+'\n'
for pos in pos_list:
theSNP=str(SNP_REF[pos]).replace('[','').replace(']','')
allStr+=theSNP
output=open(r'C:\Users\18019\Desktop\VCF\Vibrio.VCF\total_snp.txt','w')
output.write(allStr)
output.close()
代码仅供参考,具体问题具体分析。。。
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