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生信数据预处理的Linux三大神器

生信数据预处理的Linux三大神器

作者: xuzhougeng | 来源:发表于2017-03-24 21:30 被阅读333次

    grep:最快的文本搜索工具

    grep就是在文本提取和匹配上最快的工具,因为它只有一个目标,在每一行找匹配的内容,并且在这个任务上没有其他程序比他是做的更好。

    继续以拟南芥基因组和注释文件作为练习对象(下载方式见我上一篇文章)。

    • 在注释文件中查找某一个基因如AT5G25475
    $ grep "AT5G25475" TAIR10_GFF3_genes.gff  | head -5
    Chr5    TAIR10  gene    8867797 8869821 .       -       .       ID=AT5G25475;Note=protein_coding_gene;Name=AT5G25475
    Chr5    TAIR10  mRNA    8867797 8869652 .       -       .       ID=AT5G25475.1;Parent=AT5G25475;Name=AT5G25475.1;Index=1
    Chr5    TAIR10  protein 8867920 8869492 .       -       .       ID=AT5G25475.1-Protein;Name=AT5G25475.1;Derives_from=AT5
    G25475.1
    Chr5    TAIR10  five_prime_UTR  8869493 8869652 .       -       .       Parent=AT5G25475.1
    Chr5    TAIR10  CDS     8869391 8869492 .       -       0       Parent=AT5G25475.1,AT5G25475.1-Protein;
    
    • 希望搜索AT5G25475但是不包含CDS(-v:反向选择)
    $ grep "AT5G25475" TAIR10_GFF3_genes.gff  | grep -v 'CDS' | head -5
    Chr5    TAIR10  gene    8867797 8869821 .       -       .       ID=AT5G25475;Note=protein_coding_gene;Name=AT5G25475
    Chr5    TAIR10  mRNA    8867797 8869652 .       -       .       ID=AT5G25475.1;Parent=AT5G25475;Name=AT5G25475.1;Index=1
    Chr5    TAIR10  protein 8867920 8869492 .       -       .       ID=AT5G25475.1-Protein;Name=AT5G25475.1;Derives_from=AT5
    G25475.1
    Chr5    TAIR10  five_prime_UTR  8869493 8869652 .       -       .       Parent=AT5G25475.1
    Chr5    TAIR10  exon    8869391 8869652 .       -       .       Parent=AT5G25475.1
    

    反向选择与head,wc连用的时候,可以先排除一些注释信息('#'),再操作。

    • 基因组中查找某一段特定序列并查看上下文(-A n:显示后n行-B,n:显示前n行,-C= -A,-B)
    $ grep -A 2 'TTATTGTTGTTAAGAAAAAAGG' TAIR10_chr_all.fa
    GTCGCCGCATTTTGTAATGCATACTTGTCTCTGTTATTGTTGTTAAGAAAAAAGGAGCACAAGTTGAGCAATGAAATAA
    AATTGAATGGGCTAATGCTACAATCCCTTTTAATCAGCACAAATTGAATTAAGTTGAGGTGATTAAAAGGGATCTATCT
    AGGTTTGTGGCAACAATAATAAAATGGAATCACAAACAAACTCCATAAAGGTAACCCTAAAAAAGGAGGGAAATCGCAA
    
    • 在基因组中统计某一段序列出现的个数 (-c : count)
    $ grep  'TTATTGTTGTTAAGA' TAIR10_chr_all.fa  -c
    2
    # 其实还可以接wc -l
    $ grep  'TTATTGTTGTTAAGA' TAIR10_chr_all.fa  | wc -l
    2
    
    • 只返回匹配到的内容
    $ grep  'TTATTGTTGTTAAGA' TAIR10_chr_all.fa  -o
    TTATTGTTGTTAAGA
    TTATTGTTGTTAAGA
    

    如果你想查找一个以AT5G254开头以1结尾的基因,你就要用到强大的正则表达式。

    $ grep 'AT5G254.*5$' TAIR10_GFF3_genes.gff
    Chr5    TAIR10  gene    8834206 8837248 .       +       .       ID=AT5G25415;Note=protein_coding_gene;Name=AT5G25415
    Chr5    TAIR10  gene    8848549 8848986 .       +       .       ID=AT5G25425;Note=protein_coding_gene;Name=AT5G25425
    Chr5    TAIR10  gene    8867797 8869821 .       -       .       ID=AT5G25475;Note=protein_coding_gene;Name=AT5G25475
    

    awk: 强大的文本操作工具

    在上篇文章中,我使用了许多linux基本命令去完成一些琐碎的生信数据处理任务。而在awk眼中,这些任务它一个人就能搞定。awk:"我要打十个"

    awk的工作原理

    awk擅长处理表格形式的数据。它逐行从文本中读取数据,将整行数据(record)定义为$0,然后根据指定的分隔符,将各列数据(record)分别定义为$1,$2,$3

    然后使用如下结构处理数据

    pattern1 {action1};pattern2 {action2};....
    

    形如if函数,当满足pattern时执行后接的action.
    注意

    • 如果没有定义pattern,则直接执行action;
    • 如果没有提供action,则直接输出满足pattern的内容

    基本用法

    首先让我们用awk实现cat,cut这些命令。

    • cat
    $ awk '{print $0}' TAIR10_GFF3_genes.gff | head -2
    Chr1    TAIR10  chromosome      1       30427671        .       .       .       ID=Chr1;Name=Chr1
    Chr1    TAIR10  gene    3631    5899    .       +       .       ID=AT1G01010;Note=protein_coding_gene;Name=AT1G01010
    
    • cut
    $ awk '{print $1,$4,$5}' TAIR10_GFF3_genes.gff | head -2
    Chr1 1 30427671
    Chr1 3631 5899
    

    awk除了能输出指定列,还能重排,甚至换一种分隔符,比cut更加强大

    $ awk '{print $4","$5","$1}' TAIR10_GFF3_genes.gff | head -1
    1,30427671,Chr11
    

    进阶功能

    除了这些简单的功能以外,awk还支持

    • 算术运算(+,-,*,/,%,),
    • 逻辑运算(==,!=,<,>,>=,<=),
    • 或与非(&&,||,!),
    • 还可以进行模式匹配(ab,a!b)。
      当然知道有这些内容还不够,我们还要在实际中使用。

    实例:找到长度大于10kb且在一号染色体的注释内容

    $ awk '$5 - $4 > 10000 && $1 ~ /Chr1/' TAIR10_GFF3_genes.gff  | head -5
    Chr1    TAIR10  chromosome      1       30427671        .       .       .       ID=Chr1;Name=Chr1
    Chr1    TAIR10  gene    373335  386847  .       +       .       ID=AT1G02080;Note=protein_coding_gene;Name=AT1G02080
    Chr1    TAIR10  mRNA    373335  386847  .       +       .       ID=AT1G02080.1;Parent=AT1G02080;Name=AT1G02080.1;Index=1
    Chr1    TAIR10  protein 373335  386682  .       +       .       ID=AT1G02080.1-Protein;Name=AT1G02080.1;Derives_from=AT1
    G02080.1
    Chr1    TAIR10  mRNA    373501  386846  .       +       .       ID=AT1G02080.2;Parent=AT1G02080;Name=AT1G02080.2;Index=1
    

    练习题: 请找到长度小于1kb,在2号或者三号染色体注释

    awk还有两个特殊模式BEGIN,END,顾名思义就是在操作开始或/和结束后才执行的操作。

    实例: 计算长度1号染色体cds的平均长度.

    $ awk 'BEGIN  {s = 0;line = 0 } ;$5 - $4 > 10000 && $1 ~ /Chr1/ { s += ( $5 - $4 );line += 1}; END {print "mean=" s/line
    }' TAIR10_GFF3_genes.gff  | head -5
    mean=227598
    

    练习题:请计算2号染色体和3号染色体的CDS的平均长度。

    awk内部有许多特殊变量,如NR,表示当前所在的行数
    实例: 显示第3-5行数据类似于head -n5 | tail -n2

    $ awk ' NR>=3 && NR <=5 {print $0}' TAIR10_GFF3_genes.gff
    Chr1    TAIR10  mRNA    3631    5899    .       +       .       ID=AT1G01010.1;Parent=AT1G01010;Name=AT1G01010.1;Index=1
    Chr1    TAIR10  protein 3760    5630    .       +       .       ID=AT1G01010.1-Protein;Name=AT1G01010.1;Derives_from=AT1
    G01010.1
    Chr1    TAIR10  exon    3631    3913    .       +       .       Parent=AT1G01010.1
    

    awk还有一个类似于Python的字典结构,叫做关联数组(associative array).使用这个我们就可以实现cat xx.file cut -f '2'| sort | uniq -c | sort类似的操作

    $ awk '$1 ~ /Chr1/ { feature[$3] += 1};\
    END { for (k in feature) print k "\t" feature[k]}' TAIR10_GFF3_genes.gff
    pseudogene      241
    ncRNA   144
    exon    58048
    chromosome      1
    snRNA   2
    protein 9263
    ...
    

    除此之外,他还可以使用if,for,while,还有许多常用的函数(见下表),所以说awk真的可以当做一门编程语言学习了。不过如果真的需要特别多的处理步骤,其实你可以直接使用Pyhton/perl等更强大的编程语言了。

    函数 功能
    length(s) s的长度
    tolower(s) 转成小写
    toupper(s) 转成大写
    substr(s,i,j) 返回s的i-j部分
    split(s,x,d) 根据分隔符d分隔数据,赋值给x
    sub(f,r,s) 根据正则f从r中提取数据到s

    番外:bioawk 生物版awk

    虽然awk非常强大,但是如果它能够自动识别我们生物数据格式(如GFF/GTF,FASTQ/FASTA/,BED),自动分配record该多好。

    请大家膜拜一下Heng Li,然后去下载bioawk
    具体用法就不细说了。可以将bioawk代替awk重复前面的练习和实例。

    sed: 流处理工具

    sed的功能同样也很强大,但是这里只负责介绍两个常用的模块:文本替换和显示特定行。
    假如有一个文件a.txt如下内容:

    chrom1    123    456
    chrom2    123    456
    chrmo3    123    456
    

    我们可以很方便的使用sed将chrom替换成chr:

    # sed 's/pattern/replacement/' file
    sed 's/chrom/chr/' a.txt 
    chr1    123    456
    chr2    123    456
    chr3    123    456
    

    假设我们只想打印第2行,处理可以用head加tail或者awk完成,还可以用sed

    #sed -n 'n1,n2p' file.txt
    # -n 只输出编辑部分;p打印;n1,n2从以n1到n2
    sed -n '2p' a.txt
    

    由于许多sed的功能都和前面的awk和grep冲突,所以这里只介绍了这两个功能。

    如果想了解更多 awk和sed的功能,可以到http://dongweiming.github.io/sed_and_awk进入深入的学习。

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