宏基因组之基因预测

作者: 凯凯何_Boy | 来源:发表于2020-07-15 21:21 被阅读0次

    12年有篇BMC的文献对几款预测的软件做了评估,其实参考大多数的文献中最常见的俩个软件也就是Prodigal和Metagenemark这俩个软件,分析过程中我这俩个软件都感受一下,现在将过程记录一下~~有兴趣的话可以看看这篇文献哦

    图片.png

    MetageneMark

    安装地址

    图片.png

    选择图中该版本,下面红*的选项填写完毕后,点击下方agree


    图片.png

    跳出来该页面后,就可以选择下载了,上面是软件,下面是个64位的key,也需要下载,这个key会有期限,时间到了再进该网站重新下载下即可,我们将其放在软件目录下


    图片.png
    接着操作
        gunzip gm_key64.gz
        mv gm_key64 gm_key (重命名)
        拷贝权限:cp gm_key ~/.gm_key
    

    现在就可以使用了,就是gmhmmp这个软件,用软件前先看下它的帮助文档,了解下参数的意义,我常用的命令行如下

    gmhmmp -a -d  -m MetaGeneMark_v1.mod final.contigs.fa  -A protein.fasta -D nucleotide.fasta
    

    -A 输出蛋白 -D输出CDS核酸序列,另外还有-f 可以控制输出gff文件,请自行了解.

    图片.png

    感觉这个软件输出的结果不太友好,一是fa文件的ID有太多没用的信息,二是每个基因上的不同CDS名字竟然一样,至少给个1、 2区分一下吧,这里我想到了最近学的一个大神写的软件seqkit里的rename,大家可以去看下这个软件教程,地址里面的各个子软件真的能帮助走不少的弯路。先操作一下:

    less F1_genemark.txt |sed '/^$/d;s/.*\t//g;s/ .*//g'|seqkit rename|sed 's/ .*//' |less
    
    图片.png

    这样看上去就好多了,但是强迫症的我发现每个基因的第一个ID后面没有_1,只是从第二个相同的ID后开始加上了_2,3标识符进行了区分,所有我就写了个python小脚本改动一下,很简单思路就是ID里面如果只有一个符号的,ID后面加个1,^^shell还不是太精,如果有啥方法直接shell后面加几句改的话,可以告诉我。总之最后样子就是这样

    图片.png
    软件输出的fa是多行的,这里改成单行看着舒服点,好了接下来拿着这个文件进行后续分析了。

    Prodigal

    这个软件是我最开始用的,因为它的结果输出就比较友好,不用像上面那样再多余的步骤。看下输出文件的样子 图片.png

    ID后面加了_1 _2区分,其他信息不想要了也可以sed一下删除了
    这里也贴下我跑这个软件命令行

     prodigal -p meta -a protein_seq.fasta -m -d nucleotide_seq.fasta -o genes.gff -f gff -s poteintial.stat -i /home/pub_guest/hekai/rawdata/D1_megahit.asm/final.contigs.fa
    

    参数我就不解释了,还是那几个输出文件,直接-h 看吧,提醒下如果是宏基因组数据记得加上-p mate参数~~

    至于选用哪个软件,实践是检验真理的唯一标准反正两个的结果还是有点差异的,用prodigal总是比metagenemark的结果要少一点 ,自己动手试试吧~~~

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