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病毒包装,目标细胞感染

病毒包装,目标细胞感染

作者: 找兔子的小萝卜 | 来源:发表于2020-11-11 13:15 被阅读0次

    第一步

    3ug 2G
    3ug X2
    6ug 目标质粒
    opti-medium 150ul
    混合为A,静置5min

    40ul PEI+110ul opti-medium 混合为B,静置5min

    第二步

    A与B mix 静置30min
    此时给100mm的皿换3ml的opti-medium

    第三步

    4h后换全培养基
    第二天早晨换液
    换液后48小时收病毒(0.45的筛子)

    第四步

    此时准备A549细胞
    60mm
    3ul(1:1000) polyberen
    1ml 全培养基
    2ml 的病毒(在细胞传代同时进行感染)
    培养过夜换液
    8小时候换液
    第二天早晨继续上述病毒感染(感染重复3次)

    第五步

    使用诱导剂,诱导3,5,7
    收样 测Wb,PCR

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