第一步
3ug 2G
3ug X2
6ug 目标质粒
opti-medium 150ul
混合为A,静置5min
40ul PEI+110ul opti-medium 混合为B,静置5min
第二步
A与B mix 静置30min
此时给100mm的皿换3ml的opti-medium
第三步
4h后换全培养基
第二天早晨换液
换液后48小时收病毒(0.45的筛子)
第四步
此时准备A549细胞
60mm
3ul(1:1000) polyberen
1ml 全培养基
2ml 的病毒(在细胞传代同时进行感染)
培养过夜换液
8小时候换液
第二天早晨继续上述病毒感染(感染重复3次)
第五步
使用诱导剂,诱导3,5,7
收样 测Wb,PCR
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