介绍
- Trimmomati 用于去除 Illumina平台的FASTQ序列中的Adapter,根据碱基质量值修整FASTQ序列文件
- 支持单末端(SE),双末端(PE)测序数据
- 支持多线程,gzip,bzip2压缩的FASTQ文件
- 支持phred-33 和 phred-64 格式互相转化,目前多数Illumina测序数据为phred-33格式
安装
conda install -c trimmomati
这里需要安装Conda (一款用于安装多数生物信息分析软件的管理软件,重要的是可以解决软件的依赖问题) : Conda 安装使用图文详解
使用
单末端测序数据:
trimmomatic SE -phred33 input.fq.gz output.fq.gz ILLUMINACLIP:TruSeq3-SE:2:30:10 LEADING:3 TRAILING:3 SLIDINGWINDOW:4:15 MINLEN:36
双末端测序数据:
trimmomatic PE -phred33 input_forward.fq.gz input_reverse.fq.gz output_forward_paired.fq.gz output_forward_unpaired.fq.gz output_reverse_paired.fq.gz output_reverse_unpaired.fq.gz ILLUMINACLIP:TruSeq3-PE.fa:2:30:10 LEADING:3 TRAILING:3 SLIDINGWINDOW:4:15 MINLEN:36
常用参数:
-threads 线程数,最大是CPU核数
-trimlog 生成日志名,强烈建议不开这个参数,生成的log文件巨大且大多数情况下,你是不会看的
-quiet 静默模式
与其他软件命令不同,Trimmomatic提供了多种修整步骤:
- ILLUMINACLIP:从reads中剪切adapter和其他Illumina特定序列。
- SLIDINGWINDOW:执行滑动窗口修剪,一旦窗口内的平均质量低于阈值,则切割。
- LEADING:如果低于阈值质量,则在reads起始处剪切碱基
- TRAILING:如果低于阈值质量,则在reads末尾处剪切碱基
- CROP:将reads从末尾切割为指定长度
- HEADCROP:从reads剪切后低于指定长度,则删除
- MINLEN:如果reads低于指定长度,则删除
- TOPHRED33:将质量得分转换为Phred-33
- TOPHRED64:将质量得分转换为Phred-64
双末端测序命令解释:
PE模式中,输入文件有两个input_forward.fq.gz
input_reverse.fq.gz
输出文件有四个(output_forward_paired.fq.gz
output_forward_unpaired.fq.gz
output_reverse_paired.fq.gz
output_reverse_unpaired.fq.gz
),其中过滤之后双末端序列都保留的是paired,只保留一端序列的就是unpaired
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