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变量交互模式(即分子间调控问题)

变量交互模式(即分子间调控问题)

作者: 7523_68db | 来源:发表于2020-05-05 18:58 被阅读0次
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两大经典调节

1.miRNA调节mRNA
2.转录因子TF/激活子(促进转录),主要是可调节性转录因子

思路:当某一基因高表达时自然会想到是不是由于转录因子的高表达导致基因的过表达
抑制转录机制:转录因子结合DNA序列抑制RNA聚合酶与启动子结合(原核生物中的遏制子)

如何知道是哪个转录因子对基因产生调控:

1.要通过数据库查出目的基因的启动子序列
2.克隆出相应的启动子序列
3.预测哪些转录因子可能与你所测出的启动子存在关系。

  1. 实验证明转录因子和启动子之间确实存在调控关系:(相互佐证)
    荧光素酶报告基因实验
    CHIP染色质免疫共沉淀实验
    EMSA凝胶迁移实验
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    分子间调控.png

两大经典调节

1.miRNA调节mRNA
2.转录因子TF/激活子(促进转录),主要是可调节性转录因子

思路:当某一基因高表达时自然会想到是不是由于转录因子的高表达导致基因的过表达
抑制转录机制:转录因子结合DNA序列抑制RNA聚合酶与启动子结合(原核生物中的遏制子)

如何知道是哪个转录因子对基因产生调控:

1.要通过数据库查出目的基因的启动子序列
2.克隆出相应的启动子序列
3.预测哪些转录因子可能与你所测出的启动子存在关系。

  1. 实验证明转录因子和启动子之间确实存在调控关系:(相互佐证)
    荧光素酶报告基因实验
    CHIP染色质免疫共沉淀实验
    EMSA凝胶迁移实验
    5.有结合不一定有功能:因此做过表达和沉默转录因子观察表型是否会发生改变。或者rescue验证。

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