口诀：先辨主次，再分上下，两两调控，三三回复

一、药物+分子（创新点）+通路（间接作用机制）

核心：主变量是谁？被上游哪个因素调控，影响下游哪个因素
先两两配对证明调控关系，再通过rescue串联起来。

二、分子+分子（创新点）+通路（直接作用机制）

先做下游，再做上游（找到公认的大明星）

直接作用机制.png 三元“五步”最简论证法.png

步骤：

1.研究背景：大量研究表明某一分子表达的多少和疾病表型密切相关。

2.研究者创新发现：另一分子表达的多少与疾病表型密切相关。
这一步即单变量研究的基本方法
表达差异，正反验证，细胞动物

3.先做下游：研究主变量为什么会对表型产生作用，因为它调控了研究背景中的已知分子。
通过上调或者下调主变量观察已知分子的表达差异

4.再做上游：主变量怎么发生变化？通过上游分子调节

5.rescue验证：推荐做围绕主变量有治疗效果的方向

6.再往高分走：上游分子是如何作用于主变量的？
上游： RNA、蛋白质
下游：DNA、 RNA、蛋白质
他们之间相互连线关系

上下游调控.png
分子间调控.png

具体案例：

大量研究表明大米的多少和人类饥饿表型密切相关。
研究者创新发现老鼠的多少和饥饿表型密切相关。（通过单变量研究套路论证）
往下游走：老鼠通过影响大米的多少来影响饥饿表型（增加老鼠检测大米，这里只需要单向检测就可以了）
往上游走：猫的多少影响老鼠的多少（同样单向，加猫或者减猫），顺带检测米的变化。
rescue验证：推荐做围绕主变量有治疗效果的方向