Mycoheterotrophs(真菌异养型植物):植物和真菌的共生大概开始于450百万年前。真菌异养是一种特殊的植物-真菌共生类型,植物从共生真菌获得固定碳和其他营养物质,而非光合作用。兰花最具特殊的地方是种子萌发和营养吸收依赖于真菌,例如通过于真菌形成根瘤。99%的兰花在幼年阶段从真菌伙伴获得碳营养,而成年后自养。另一小部分兰花由于缺乏achlorophyllous,是专性真菌异养。
天麻(Gastrodia elata)基因组大小为1.06Gb,是专性的真菌异养型植物,包含18,969个蛋白编码基因。很多在植物中保守的基因从天麻基因组中删除了,包括大部分参与光合作用的基因。大量基因家族扩张证明了适应真菌异养生活方式。扩张的基因家族包括糖苷水解酶,尿素酶,ATPases等。作者还发现天麻叶绿体基因组比一般植物基因组小,而天麻线粒体基因组是至今最大的一个。
天麻(兰花科)是一种传统中药,属于专性真菌异养型植物。在其生活史中,至少存在两种真菌异养,种子萌发期是Mycena(小菇属),植物生长期是Armillaria mellea(蜜环菌)。为了获取营养,它和蜜环菌生活关联起来,并在36个月的生活史中,80%的时间都是作为块茎在地下生活。天麻可以帮助我们理解真菌异养型植物的基因组特点,因此,作者组装出了天麻的参考基因组,为理解植物-真菌关联的进化基础。
测序及组装:
Kmer评估基因组为1.18Gb,基因组组装出3779条scaffold,scaffold N50为 4.9 Mb,contig N50为68.9 kb。Chloroplast genome为35,326 bp,Mitochorial genome为1,340,105 bp。Trinity组装出80,646条转录本,其中94.41%的转录本被认为是完整的(转录本的90%区域能被比对到同一条连续的scaffold上)。CEGMA评估为96.37%(239/248,保守的真核核心基因)。
TEs在基因组中占比66.18%,其中Class I (retrotransposons)和Class II (DNA transposons) TEs分别在基因组中占比55.94%和4.38%。天麻和桃红蝴蝶兰(Phalaenopsis equestris)LTR活动类似,而铁皮石斛(Dendrobium officinale)LTR呈现出最近爆发的活动。预测出天麻基因组中有18,969个蛋白编码基因,其中81.6%可被功能注释。天麻转录组分析揭示了在5个生长时期有10,548个差异表达基因,这些差异表达的基因聚成个不同的组,代表天麻的特定生长阶段。
系统发育和全基因组复制:
比较兰科植物天麻,桃红蝴蝶兰,铁皮石斛,表明它们的分歧时间约67百万年。在天麻基因组中有两个古老的全基因组复制事件(WGD event)。该事件也在桃红蝴蝶兰和铁皮石斛的基因组中发现,表明事件发生在3种兰科物种分化之前。较老的WGD在大多数单子叶植物中都存在,而最近的WGD事件可能存在于现存的兰花植物中,并可能导致兰花植物的分化。
基因组中广泛的基因丢失:
桃红蝴蝶兰,铁皮石斛分别由29,431,28,910个蛋白彪马基因,而天麻只有18,969个蛋白编码基因,是迄今为止观测到的被子植物最小的蛋白质组。与桃红蝴蝶兰,铁皮石斛相比,有功能注释的基因在天麻基因组中全局减少,同时还发现几个pfam 结构域家族在天麻基因组中显著性减小,与14个被子植物相比,天麻有最小数目的基因家族。一些基因和基因家族数量很少,表明在天麻基因组中被淘汰,并且许多其余的基因家族已经收缩。基因家族收缩分析表明与另两个兰科植物相比,天麻有3586个基因家族收缩。BUSCO分析表明195 (20.4%)个高保守的基因在天麻基因组中丢失。
假基因化和基因组重排是天麻丢失基因的原因。与桃红蝴蝶兰,铁皮石斛相比分别876, 1080个基因出现假基因化,全基因组比对发现487个基因由于局部重排而丢失。基因组中数据减少的基因是与植物抗性相关的基因。
光合作用系统退化:
天麻不进行光合作用,富集“叶绿体”,“质体“注释的基因在基因组中具有代表性的丢失
线粒体基因组扩张
天麻线粒体有430个基因家族,1532个基因。GO分析表明这些基因参与一些代谢过程。
共生微生物的管理:
探究天麻基因组中扩张的基因家族对与真菌微生物关联的影响,发现单子叶甘露聚糖结合凝集素抗真菌蛋白家族(GAFP)在天麻基因组中包含20个基因,而桃红蝴蝶兰,铁皮石斛中分卸只有3个和10个。GAFP蛋白被证明在体外抑制子囊菌和担子菌真菌植物病原体的生长。80%的GAFP 基因表现出在原球茎,年轻块茎中,这两个生长阶段是天麻与真菌建立稳定共生之前。
信号转导和营养转移:
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