一直说比对之前要去接头,那么我们去的接头是什么样子的呢?我一开始以为就是在待测序的reads加上一段碱基顺序已知的序列就可以了,后来发现 情况和我想象的不大一样。怎么回事捏?就拿Illumina来说,它测序常使用的接头是Y型接头。那么什么是Y型接头呢?它又有什么优点呢?
Y型接头,故名思意,长的和字母Y一样。在接头的末端,碱基是不互补的。接头由两部分组成,其中的arm部分是非互补序列,而stem部分是互补序列可以加到测序的reads上。Y adapter的样子就像下面的图一样:
![](https://img.haomeiwen.com/i6415244/bfe37d056c445347.png)
当我们将测序的reads加上接头,就变成了这个样子:
![](https://img.haomeiwen.com/i6415244/b3c44ffdd9bb2b2e.png)
在这里小声说一句,其中的绿色部分是待测序的reads
emmmm,这样有了图片就让我这苍白无力的文字形象了很多……那么,知道了它是什么样子之后,我们下一步想知道的就是为什么要使用Y型adapter了。
当我们进行建库的时候,会在reads的两端加上不同的adapter。这里我们把两个adapters称为A和B。当我们加上接头之后,会出现三种不同的情况:
- A--reads--B
- A--reads--A
- B--reads--B
显然,后两种情况是无法进行PCR扩增的。但是常规的adapter无法避免这种情况的存在,但是有了Y型adapter,就可以保证只出现第一种情况。
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