文章背景

脑胶质瘤是大脑和脊髓胶质细胞癌变产生的、最常见的原发性颅脑肿瘤。发病率、复发率及死亡率较高且预后较差。作者先前研究发现：胶质瘤通过外泌体将促肿瘤miRNAs传递给TME中的免疫细胞，从而诱导免疫抑制类型的免疫细胞，进一步促进肿瘤进展。然而，外泌体中的抑癌miRNAs是否仍在TME中发挥抑癌作用机制仍不清楚。

研究结果

1、脑胶质瘤患者脑脊液sEV的RNA表达模式

本研究样本为脑胶质瘤患者的肿瘤组织及其术前、术后和随访期的全病程脑脊液。作者利用液体活检大数据库BrainLiquid&CEGA对脑胶质瘤患者的肿瘤组织进行全转录组以及WES的测序分析、对脑脊液进行外泌体全转录组测序分析，比较CSF中各种RNA（miRNA、mRNA、lncRNA和circRNA）的表达谱，发现仅sEV miRNA具有最稳定的表达特征，可作为生物标志物，指示CSF液体活检中的肿瘤负荷状态。

对肿瘤负荷的CSF和肿瘤组织的测序数据进行差异表达分析，由分析结果得出共443 个差异表达的miRNAs，并按照分泌特征、依据PCA分析将其分为三大类五种亚型。

图1 脑脊液sEV队列研究流程图

图2 5种外泌体miRNAs分泌类型

2、miR-1298-5p可在体外和体内抑制胶质瘤的增殖

作者对外泌体型miRNA miR-1298-5p进行了深入研究，在人源胶质瘤细胞系U87MG、U251及原代细胞P3中过表达miR-1298-5p mimics，通过CCK8、EdU、western blot、流式细胞术等实验发现miR-1298-5p可以通过靶向SetD7影响AKT信号通路来抑制胶质瘤的增殖能力。

图3 miR-1298-5p抑制胶质瘤增殖能力

3、hnRNPA2B1蛋白选择性包裹miR-1298-5p靶向递送至外泌体

结合POSTAR2数据库，通过RNA pull down、RIP等实验发现蛋白hnRNPA2B1可以靶向结合miR-1298-5p的UUCA序列，并且在胶质瘤细胞中敲除hnRNPA2B1蛋白后，miR-1298-5p在外泌体中含量明显下降，这些结果表明胶质瘤细胞可以通过蛋白hnRNPA2B1将miR-1298-5p分选到外泌体中从而将其排出肿瘤细胞，细胞内抑癌分子被清除，进而促进肿瘤的恶性进展。

图4 hnRNPA2B1靶向递送miR-1298-5p至外泌体

4、miR-1298-5p可促进MDSCs的免疫抑制能力

外泌体选择性包裹miR-1298-5p递送至髓系来源的免疫抑制细胞（MDSCs）中进行过表达，作者通过PCR、Elisa等实验证明miR-1298-5p可以增加MDSCs分泌NO及TGF-β两种促癌细胞因子，增强MDSCs对CD8+T细胞的免疫抑制能力，从而进一步促进肿瘤的恶性进展。

图5 miR-1298-5p促进MDSCs的免疫抑制能力

研究结论

脑胶质瘤可以通过分选抑癌miRNAs达到清除细胞内抑癌分子，促进肿瘤细胞进展的作用，也可通过将这些抑癌miRNAs利用外泌体靶向递送至肿瘤微环境中的抑制性髓系免疫细胞，进而促进肿瘤免疫微环境恶化，从而发挥双重促肿瘤的作用，该研究创新性地提出了胶质瘤外泌体分选miRNAs的新机制，为脑胶质瘤的治疗和诊断提供了新的思路和理论依据。

图6 脑胶质瘤通过外泌体分选miRNAs的机制图

研究思路

参考文献

[1] The dual role of glioma exosomal microRNAs: glioma eliminates tumor suppressor miR-1298-5p via exosomes to promote immunosuppressive effects of MDSCs[J]. Cell Death & Disease.