美文网首页
冻融法回收DNA片段

冻融法回收DNA片段

作者: xiaosine | 来源:发表于2018-08-11 21:55 被阅读19次
  1. 紫外灯下仔细切下含待回收DNA的胶条,将切下的胶条(小于0.6g)捣碎,置于1.5ml离心管中;

  2. 加入等体积的Tris-HCl饱和酚(pH 7.6),振荡混匀;

  3. -20℃放置5-10min;

  4. 4℃离心10000g×5min,上层液转移置另一离心管中;

  5. 加入1/4体积H2O于含胶的离心管中,振荡混匀;

  6. -20℃,放置5-10min;

  7. 4℃离心10000g×5min,合并上清液;

  8. 用等体积酚/氯仿、氯仿分别抽提一次,取上清;

  9. 加入1/10体积3M NaAc(pH 5.2)、2.5倍体积预冷的无水乙醇,混匀;

  10. -20℃,静置30min;

  11. 4℃离心13000g×10min,弃上清,75%乙醇洗沉淀1-2次,晾干;

  12. 加适量H2O或TE溶解沉淀。

相关文章

  • 冻融法回收DNA片段

    紫外灯下仔细切下含待回收DNA的胶条,将切下的胶条(小于0.6g)捣碎,置于1.5ml离心管中; 加入等体积的Tr...

  • 重组DNA分子的构建

    重组DNA分子的构建【实验目的】熟悉DNA的酶切、片段回收、DNA连接、转化以及重组子的筛选的方法。【实验原理】 ...

  • 17.Roche 454测序

    原理 建库 利用喷雾法将待测DNA打断成300-800bp长的小片段,并在片段两端加上不同的接头,或将待测DNA变...

  • 亲子鉴定-短串联重复DNA片段长度法

    1 原理 短串联重复DNA片段长度法是目前较成熟的“亲子鉴定”方法。 短串联重复DNA,英文叫作“Short Ta...

  • 磁珠回收DNA和片段筛选

    刚接触磁珠(beads)纯化时,觉得磁珠这东西好神奇,竟然能回收不同长度的DNA。其实磁珠只是能吸附大于某个...

  • 基因测序技术发展历史以及一、二、三代测序技术原理及应用

    基因测序技术 基因测序技术也称作DNA测序技术,即获得目的DNA片段碱基排列顺序的技术,获得目的DNA片段的序列是...

  • 分子生物学 | DNA重组 笔记整理

    DNA重组概述 重组的概念及意义 1、DNA重组的概念 DNA重组是由不同DNA链的断裂和连接而产生的DNA片段的...

  • 用samtools的rmdup去除PCR重复reads

    建库中有一步是: PCR扩增加了接头的DNA片段。理想情况下,对打碎的基因组DNA,每个DNA片段测且仅测到一次。...

  • 引物纯化方式

    引物纯化方式 PAGE纯化:PAGE纯化法是使用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,对引物DNA进行分离,然后从凝胶中回收目的...

  • 2018-03-12

    一,illumina测序相关知识 文库:DNA片段两端加上特定的DNA接头。 文库制作步骤: 1,超声波打断DNA...

网友评论

      本文标题:冻融法回收DNA片段

      本文链接:https://www.haomeiwen.com/subject/sbkjbftx.html