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CRISPR-Cas9基因敲除实验步骤 day 25? 正式实验

CRISPR-Cas9基因敲除实验步骤 day 25? 正式实验

作者: 冻春卷 | 来源:发表于2019-04-01 00:38 被阅读0次
    基础知识系列链接(节选):

    CRISPR-Cas9学习笔记
    Cre-LoxP条件性基因编辑系统--学习笔记
    FLP-FRT系统--诱导性基因编辑inducible gene editing

    系列实验链接:

    CRISPR-Cas9基因敲除sgRNA设计
    CRISPR-Cas9(三)--sgRNA设计好之后
    CRISPR-Cas9基因敲除实验步骤 day 1
    CRISPR-Cas9基因敲除实验步骤 day 2
    CRISPR-Cas9基因敲除实验步骤 day 3
    CRISPR-Cas9基因敲除实验步骤 day 4
    CRISPR-Cas9基因敲除实验步骤 day 5-15 转染验证
    CRISPR-Cas9基因敲除实验步骤 day 18 转染后验证

    经过293FT细胞验证质粒的效果之后,要接着做正式实验了,这里我们用的方法跟文献中的就不一样了。张峰老师组使用的是电转的方法,而我们还是选择了脂质体瞬转的方法,我想这一个实验应该是根据实验室条件来做选择了。因为学院的sorting要提前一个星期预约,所以我们妥妥的又拖延了一周,好不容易做了一次,因为经验不足,细胞也没活(一株超难转的细胞),这周还想接着做,可是管sorting的老师下周休一整周的假,好刺激。Emmm...有点头大,还是应该要提前安排好会更好。流水账一样的记录,所以实验就是有这样那样的插曲。

    感谢师兄DZ

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