上世纪八十年代的化学家发明了PCR，如今DNA扩增俨然已经成为了生物学研究的基础。三十多年以来，人们为了解决研究中出现的新问题新需求，不断对这一经典技术进行改良。从经典PCR、实时定量PCR再到现在的数字PCR。qPCR和dPCR，它们之间都有什么区别呢？
目前的PCR方法主要可以分为三类：PCR、qPCR和dPCR。
PCR是最原始、最简单的PCR方法，如今仍在被我们广泛使用。使用者只能在PCR反应结束之后，通过凝胶电泳、毛细管电泳等方法对产物进行检测。PCR本身是无法定量的，因为我们只能获得反应结束的样品。通过凝胶电泳只能看出扩增质量、不同样品目的片段分子量的相对大小（通过电泳移动的距离，产生不同距离的原因可能是不同片段的扩增速度有别使得单一片段有长短，也可能与碱基含量有关）。无法根据条带颜色深浅得到量值。
qPCR主要是利用插入性染料或荧光探针（比如TaqMan），人们可以通过监控PCR过程中的荧光强度比较多个样品的DNA水平。该方法主要通过样品的Ct值（Cycle Threshold，即扩增产物的荧光信号达到设定的荧光阈值时的所对应的扩增循环数）与该样品起始拷贝数的对数存在线性关系配合标准曲线来计算样品反应前目标序列的含量的。
dPCR的原理并不复杂。首先，dPCR把反应体系均匀分配到大量反应单元中，每个反应单元中不包含或包含一个到多个目的核酸序列，目的核酸序列的数量符合泊松分布。然后在每个反应单元中独立地进行PCR扩增。扩增结束后，检测每个反应单元的荧光信号，最终根据泊松分布和荧光信号阳性的反应单元占所有反应单元的比例来计算目的核酸序列的拷贝数。
主要参考文献：
[1] 詹成,燕丽,王琳,金玉麟,陈力,时雨,王群.数字PCR技术的发展和应用[J].复旦学报(医学版),2015,42(06):786-789.
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