来总结一下第五章的内容,首先微生物实验室的质量控制主要是菌种和培养基,菌种的质量关乎于培养基,培养环境,保存条件,人为操作等
所以一切的基础在于培养基,培养基的质量保证与哪些环节有关呢?首先是配制过程,如果是按照药典的方法配制时需要准确的称量各组分;一般实验室买的是脱水培养基,按照比例加水就行了;成品化培养基要注意在贮藏过程中是否有脱水造成表面有裂缝的现象
配制好的培养基放在高压蒸汽灭菌锅中灭菌需要注意的是灭菌锅的装载量和一个灭菌时间的问题,灭菌好后的培养基要立即拿出来,冷却至25℃后测试pH,除非经验证证明该培养基的pH允许变化的范围很大,否则一般情况下不得超过标准的±0.2
培养基需要放在2~25℃的环境下保存,如果置于密闭容器中可以保存一年,实验室一般用三角锥形瓶或者平皿存放,这种非密闭容器中保存的一般在三周内使用;每批培养基使用前都需要做适用性检查,使用的菌种一定要纯 ,可以是菌种保藏中心购买的,也可以是自己分离纯化后的菌种,检验指标包括促生长能力,抑制力
菌种在整个实验中充当着对照的作用,购买一般是在国家菌种保藏中心购买,然后在实验室中复苏和传代使用,从三代开始使用,购买回来的菌株为0代,任何的转种都被视为一代,每月或每周传代一次,可以制成菌悬液或者斜面保存,传代到第五代之后就不能再使用了,需要重新复苏和传代,因为作为工作菌种来说传代次数的增加会造成菌种变异和老化。为了节约成本,买回来的冻干粉经过分离纯化后用甘油放在-80℃下保存,菌种的活力可以保持很久。菌种的保存,传代,复苏,销毁均要有相应的记录,每周对菌种进行观察,有报废的菌种要及时销毁,菌种上要贴上标签,写明传代次数,有效期等,有专人管理
好了我们来总结一下关于实验室的质量控制的重要的两个因素是培养基和菌种
培养基关键在于配制方法,灭菌和贮存
菌种在于购买,纯化,传代和保存
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