题目：
The Generation of Human γδT Cell‐Derived Induced Pluripotent Stem Cells from Whole Peripheral Blood Mononuclear Cell Culture
作者：D AISUKE W ATANABE 神户大学
期刊：2017 ,Stem Cells Transl Med
IF:5.9
目的：
为了克服T细胞衰竭的问题，研究人员已经产生了诱导多能干细胞(iPSCs)，它含有与原始T细胞相同的T细胞受体(TCR)基因，这为抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)提供了几乎无限的来源。然而，这些技术主要集中在αβT细胞上，并且需要一个抗原特异性CTL群体，这些CTL群体通过hla -多肽多聚物的细胞分选纯化，作为iPS细胞的起源。
材料与方法
1.我们使用白细胞介素-2和唑来膦酸盐刺激人全外周血单核细胞（PBMC）培养以激活γδT细胞。
2.从人γδT细胞培养物中生成iPSC
受激PBMC （1 × 104细胞）悬浮在100μlγδT细胞培养基中，CytoTune-iPS 2.0，含有2种仙台病毒，每种病毒单独编码KLF4和c-MYC，以及1种仙台病毒，其多顺式编码OCT3 / 4，KLF4和SOX2，MOI为10-30并在96孔板中培养。6小时后，将细胞接种在预包有重组层粘连蛋白-511 E8片段的511孔板上。在转导后的第3、5和7天，将另外9 ml hiPSC培养基加到培养物中。从第9天开始，每两天更换一次hiPSC培养基。从第21天开始，我们开始收集和扩大克隆。
结果
1.全PBMC培养中的γδT细胞显性基因转导
2.从全PBMC培养物中生成人γδT细胞衍生的iPSC
3.γδT 细胞衍生的 hiPSC 的表征
4.γδT-iPSCs重新分化为造血谱系
image.png
网友评论