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载体线性化的验证

载体线性化的验证

作者: Han_zh | 来源:发表于2021-07-06 19:31 被阅读0次

Q1:怎样判断载体是否完全线性化?
Q2:怎样根据电泳图确定载体线性化酶切是否完全?

A:点胶检测的时候可以点一个原始质粒。质粒是环状超螺旋结构,跑胶的时候会快一些,所以会比整个片段稍低,酶切的话会切掉一部分片段,线性化之后会比质粒跑的慢。所以会出现两种情况,一种是酶切后的线性化片段刚好和质粒跑在了一个位置,一种是质粒位置稍低。但一般是后一种情况,也就是线性化载体比质粒位置高。

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