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【三维基因组】在寻找差异盛行的时代—你以为DEseq仅仅用于寻找

【三维基因组】在寻找差异盛行的时代—你以为DEseq仅仅用于寻找

作者: XuningFan | 来源:发表于2020-09-01 23:05 被阅读0次

    https://www.bioinfo-scrounger.com/archives/111/

    DESEQ往往作为寻找差异基因的工具而被我们所熟知,但是在寻找差异盛行的年代,也可以用Deseq寻找差异contact。

    不信?来看一下:

    文章一:Alterations of specific chromatin conformation affect ATRA-induced leukemia cell differentiation


    image.png
    企业微信截图_1593404978784.png

    文章二:Highly rearranged chromosomes reveal uncoupling between genome topology and gene expression


    image.png image.png

    那么如果我们想用bin pairs 做差异contact分析,该如何做呢?
    首先以bin pair 为基本单位准备多个文库(2个左右)的raw_count_table,为每个文库准备好组别信息的condition文件。最终按照以下操作就大功告成啦~~

    library(DESeq)
    library(gplots)
    ## read raw count table
        #name  arep1  arep2  brep1  brep2
        #bin_pair1  500  500  400  700
         #............................................  
    
    data=read.table(raw_count_table,header=T,row.names=1)
    
    
    ##read condition file content like that
        #sample  condition
        #arep1  group_A
        #arep2  group_A
        #brep1  group_B
        #brep2 group_B
    
    design=read.table(conditions,header=T,row.names=1)
    
    #condition1=group_A
    #condition2=group_B
    cmp = c(condition1,condition2)
    
    dd=which(design$condition==cmp[1] | design$condition==cmp[2])
    
    new_data = data[,dd]
    #---------'generate DEseq object'--------
    cds=newCountDataSet(new_data,design[dd,1])
    print('estimate Size Factors')
    cds=estimateSizeFactors(cds)
    print('estimate Dispersions')
    cds=estimateDispersions(cds,method='per-condition',fitType="local")
    res=nbinomTest(cds,cmp[1],cmp[2])
    
    
    result = array('no',dim=c(length(res$padj),1))
    result[which(res$padj < 0.05)] = 'yes'
    total =cbind(res,counts(cds,normalized =T),result)
    
    write.table(total,file=out_result,sep="\t", quote = FALSE, row.names = FALSE)
    

    通过上面呢,我觉得只要模型对,方法都是通用的。

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