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SRA数据库简介及使用方法

SRA数据库简介及使用方法

作者: 生信摆渡 | 来源:发表于2019-12-14 13:02 被阅读0次

    来源于SRA官网

    介绍

    SRA是NIH高通量测序数据的主要存档,并且是国际核苷酸序列数据库协作(INSDC)的一部分,该数据库包括NCBI序列阅读档案(SRA),欧洲生物信息学研究所(EBI)以及日本(DDBJ)。提交给这三个组织中任何一个的数据在它们之间共享。

    SRA的任务

    • 归档来自高通量测序平台的原始测序数据和比对信息,包括Roche 454 GSSystem®,Illumina GenomeAnalyzer®,Applied Biosystems SOLiDSystem®,HelicosHeliscope®,CompleteGenomics®和Pacific BiosciencesSMRT®。

    • 使序列数据可用于研究团体,以提高可重复性。并允许通过比较数据集获取新发现。

    SRA数据

    SRA接受各种测序项目的数据,包括涉及人类受试者或其元基因组(可能包含人类序列)的重要临床研究。这些数据通常通过dbGaP(基因型和表型数据库)进行控制访问。

    功能

    1 提交文档给SRA

    使序列数据可用于研究团体,以提高可重复性。并允许通过比较数据集获取新发现。

    去:

    接受的数据

    SRA接受遗传数据以及下一代测序技术产生的相关质量得分。请参阅文件格式指南以获取更多特定信息。

    大多数SRA提交都是通过SRA提交门户向导提交的。但是,某些类型的SRA数据必须通过dbGaP或GEO数据库提交。

    请参阅

    去:

    通过SRA提交门户向导提交

    1. 登录到SRA提交门户向导
    2. 创建新的SRA提交(单击“ 新建提交 ”按钮)。
    3. 如果您之前未分别在BioProject和BioSample数据库或其他“提交门户向导”中注册过项目(Bioproject)和生物样品(Biosamples),请先注册它们。请参阅此处的SRA特定准则。
    4. 提交SRA元数据 -将链接您的项目,示例/实验和文件名的信息。请参考 SRA元数据概述
    5. 上载序列数据文件。请参考SRA文件上传帮助

    帮助链接:

    任务 描述 帮助链接
    提交中 在SRA提交向导中提交的分步说明 提交给SRA
    故障排除 在提交SRA期间对错误和警告进行故障排除 对SRA提交进行故障排除
    更新中 更新元数据,更改发布日期等 更新SRA数据

    去:

    人工数据

    在将人数据存储到公共SRA数据库之前,请确保您已获得捐赠者的同意,以使该数据可在不受保护的数据库中使用。不要将打算用于dbGaP提交的未经同意的人员数据传输到公共SRA数据库。请参考我们的dbGaP提交指南

    去:

    元基因组数据

    人类宏基因组学研究可能包含人类序列,并需要捐助者同意将其数据存档在不受保护的数据库中。如果您想将人类宏基因组序列存档在公共SRA数据库中,请联系SRA,我们将筛选并删除您提交的人类序列污染物。

    去:

    提交门户(SP)与序列读取存档(SRA)

    提交门户

    提供方便的Web向导,用于将数据提交到各种NCBI数据库。在初始数据验证之后,SP有助于将数据存放到目标数据库(例如SRA)中。目标数据库执行附加验证,并且可能会或可能不会返回SP界面中反映的错误消息。提交门户主页:https : //submit.ncbi.nlm.nih.gov/

    SRA数据库存储所有数据,并提供用于直接编辑提交内容的用户界面。登录到SRA用户界面:http : //www.ncbi.nlm.nih.gov/Traces/sra_sub/sub.cgi

    2 从Entrez搜索结果中下载SRA序列

    去:

    获取搜索结果

    任务:在SRA Entrez中查找BALB / c小鼠淋巴结组织的RNA-Seq记录

    要了解如何使用高级搜索生成器,请参阅SRA中的搜索

    • 在Entrez搜索栏中输入查询:[(((“ mus musculus” [Organism\])AND BALB / c *)AND“ lymph *”)AND“ rna seq” [Strategy]](https://www.ncbi.nlm.nih.gov/sra/?term=((("mus musculus"[Organism]) AND BALB/c*) AND "lymph*") AND "rna seq"[Strategy])
    • 要将您的搜索限制为仅aligned数据,请添加到上述查询中AND alignment data [属性]。
    • 单击记录(实验)旁边的复选框以选择感兴趣的数据。取消选中所有复选框,以从搜索中选择所有记录(实验)。

    去:

    获得 run accession

    run accession用于下载SRA数据。要下载从您的Entrez搜索中选择的run accession的清单,请执行以下操作:

    • 点击页面顶部的send to,选中单选按钮File,选择Accession List
    • 将此文件保存在运行SRA工具包的位置。

    去:

    使用SRA工具包下载序列数据文件

    请确保您正在运行该工具包的最新版本,因为较早的版本可能与最新加载的数据或最新的网络协议不兼容。

    下载公共数据

    Prefetch 是SRA工具包的一部分。该程序下载Runs(压缩的SRA格式的序列文件)以及将运行从SRA格式转换为更常用格式所需的所有其他数据。 预取可用于更正和完成不完整的运行下载。

    使用此预取命令以SRA格式从上一示例下载运行。

    prefetch --option-file SraAccList.txt
    

    fastq-dumpsam-dump也是SRA工具包的一部分,可用于将预提取的运行从压缩的SRA格式转换为fastqsam格式。例如:

    $ fastq-dump –X 5 –Z –split-files SRR000001
    

    您还可以通过在fastq-dumpsam-dump命令中仅输入不带扩展名.sra的运行登录号来避免Prefetch 步骤并一步一步下载并转换运行:

    $ fastq-dump –X 5 –Z –split-files SRR000001
    

    下载受保护的数据

    有关如何下载dbGaP数据的信息,请参见: 受保护的数据使用指南

    去:

    下载与SRA数据关联的元数据(metadata)

    从搜索结果页面

    SRA Run文件不包含有关链接到数据本身的元数据的任何信息(示例信息等)。

    要下载Entrez查询中每个Run的元数据,请单击页面顶部的Send to,选中 File 单选按钮,然后在下拉菜单中选择RunInfo

    这将生成一个表格SraRunInfo.csv文件,其中包含每个运行可用的元数据。

    从运行选择器

    可以从Run Selector!的制表符分隔的文件中下载一组稍有不同的元数据。

    要为Entrez查询中的每个Run下载元数据,请执行以下操作:

    • 点击发送到页面的顶部,检查运行选择单选按钮,然后单击按钮进入
    • 如有必要,请使用“ 运行选择器 ”界面提供的各种过滤器来优化结果。
    • 单击“ 运行信息表”按钮。这将生成一个表格SraRunTable.txt文件,其中包含每个运行可用的元数据。

    去:

    从运行浏览器下载序列数据

    运行浏览器允许对HTTP未对齐和对齐的序列进行有限的下载(一次运行一次)。

    未对齐序列示例

    • 运行浏览器中打开选定的运行
    • 单击读取选项卡。
    • 通过应用过滤条件查找某些读物或将“ 过滤条件”字段留空。
    • 点击过滤下载按钮。
    • 选择可用的下载格式,然后单击下载链接。

    比对序列示例

    • 运行浏览器中打开选定的运行
    • 单击对齐选项卡。
    • 在下拉菜单中选择可用的下载格式,然后单击“ 屏幕”或“ 文件”按钮以将运行输出到屏幕或文件中。

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    使用Amazon Web Services(AWS)下载SRA序列数据

    使用Amazon Web Services(AWS)下载SRA序列数据

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