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做NIH3T3细胞的siRNA转染,沉默效率在50%左右,请问如

做NIH3T3细胞的siRNA转染,沉默效率在50%左右,请问如

作者: 实验小助手 | 来源:发表于2023-12-06 14:50 被阅读0次

答:不知道您的具体用量,但一般可以从几个方面来提供沉默效率:

(1)优化siRNA和转染试剂的用量。具体优化方法可以在Entranster-R4000的说明书上看到。经过优化后,据我们和客户的经验,对NIH3T3,沉默效率应该可以达到80%以上。

(2)在沉默的峰值点观察结果,如在mRNA水平,可在24-48小时观察,在蛋白水平,可在更长时间如48-72小时观察。具体时间根据具体基因的表达情况确定。

(3)优化转染时的细胞数量。转染时较少的细胞数量,可延长观察时间,同时避免由于细胞密集造成的抑制。

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