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TBtools基因家族分析详细教程(3)基因家族成员的进化分析2

TBtools基因家族分析详细教程(3)基因家族成员的进化分析2

作者: Y大宽 | 来源:发表于2018-10-07 14:07 被阅读1236次
    • 基因-共线性的定义与常见算法原理
    • 物种内的共线性分析
      文件准备(物种比对到自身的.blast文件,物种基因信息文件.gff文件),运行MCScanX,输出collinear和tandem文件
    • 基因家族成员的来源分析(如何复制得到)
    • 不同物种之间的共线性分析
    • 共线性分析结果可视化

    1 共线性分析:与同线性的联系

    用途:

    • 识别直系同源gene
    • 蛋白编码基因注释
    • 发现进化事件

    2物种内的共线性分析

    3基因家族来源分析

    4不同物种之间的共线性分析

    共线性分析

    数据文件下载genome.fa,gff3,protein.fa

    2数据文件格式转换(TBtools)

    3共线性分析

    4解读文本输出结果

    -----开始----

    1 下载菠萝,水稻,拟南芥,香蕉的基因组和注释文件

    • 通过TBtools由上述文件得到CDS和protein文件(前面已讲)
    • 把菠萝蛋白比对到自身(用时相对较长)得到blast结果文件

    2 获得所有基因的位置信息


    如下



    下面可以把刚才得到的blast结果文件简化,也可以不做,做的话,下面

    3 菠萝自身的比对的结果如下

    image.png

    可视化

    先得到串联重复序列的link文件
    上面得到的.tandem文件用excel打开并进行分列,另存为txt文件

    image.png
    结果
    GRAS基因家族在染色体上的位置并显示串联重复序列
    可以看到有串联重复序列
    再把pineapple2pineapple.blast.tab.collinearity文件转换为link文件
    获得基因间关系的link文件
    结果如下
    image.png
    可以看出和视频中不一样,因为我和作者用的不是同一个基因家族
    对于比对到自身的(单个基因组)的还可以做其他的
    设置
    结果

    也可以选择性展示


    circle gene view.300dpi.jpg

    4不同物种之间的共线性分析

    分析菠萝与水稻之间的共线性区块

    • 需要菠萝的所有蛋白序列比对到水稻的所有蛋白序列
    • 两个基因组的所有基因的位置关系

    按前述步骤分别得到水稻的CDS和protein,方法不再赘述
    这里需要说明的是,视频中CDS的总序列数为66338,我下载了几个水稻品种包括reference geonome均不是,就用以下信息吧


    image.png

    取最长的可变剪切本,以使下一步分析更加准确



    接下来,这一步看具体请看需要不需要做

    ################################

    下面开始两个基因组比较

    开始菠萝和水稻比对

    image.png

    然后水稻比对菠萝

    都比对完之后,开始merge两个比对后的blast文件


    image.png

    同样gff文件也要merge

    image.png

    然后



    得到pineapple_rice.collinearity文件
    然后


    mutiple synteney plotter

    mutiple synteney plotter

    新建一个multiple文件夹

    接下来在做菠萝和香蕉的比对
    步骤按上面
    提取cds,pro(考虑可变剪切,可以选择最大长度可变剪切序列),然后互相比对得到blast结果
    上面个gff和blast结果分别merge,就可以比对了

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